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[交流]
【求助/交流】請教蛋白質(zhì)純化實驗遇到的麻煩�。�！急急
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| 各位大俠，我想問一下一般sds-page之后回收條帶之后，用什么樣的試劑盒純化的效果好，我以前用的試劑盒條帶溶解不好，而且回收效率不是很高。另一個問題是蛋白質(zhì)純化過程中，柱子的填料選擇哪種材料針對包內(nèi)酶含量較少純化效果較好呢？現(xiàn)在過柱子之后跑電泳后會出現(xiàn)雜帶。不知道生工有沒有針對這些問題的產(chǎn)品，有勞大家介紹介紹！謝謝 |
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翱宇(金幣+2): Good，鼓勵交流！ 2011-03-05 22:13:19
王張揚33(金幣+1): 謝謝��！ 2011-03-06 16:22:07
翱宇(金幣+2): Good，鼓勵交流！ 2011-03-05 22:13:19
王張揚33(金幣+1): 謝謝��！ 2011-03-06 16:22:07
| 我們沒有做過回收SDS-PAGE的蛋白，那樣是不是量也太少了吧。不知道你后續(xù)還有做點什么實驗?zāi)兀?br /> 關(guān)于你說純化的問題，用什么柱材其實決定于你想要什么純度的樣品。我們一般先用親和柱，得到比較純的蛋白，但是這時一般還是有雜帶的，下一步就用離子交換柱，最后用分子篩，一般這樣純化后的蛋白可以達(dá)到95%的純度，所以你好好研究一下自己蛋白的性質(zhì)，同時在蛋白提取的時候加入各種酶抑制劑，能保護蛋白不受降解。希望能幫到你哈 |
3樓2011-03-05 20:41:58
2樓2011-03-05 19:10:08
王張揚33(金幣+2): 謝謝��！我試試看看 2011-03-06 16:20:07
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PAGE膠蛋白微量回收試劑盒 Micro Protein PAGE Recovery Kit 產(chǎn)品說明：十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）不僅可用于檢測蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一，隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化，有必要從凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測定等，本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的微量蛋白膠回收法,本產(chǎn)品適用于從考染（SK3011），銅染（BSP017）或鋅染（BSP019）中回收蛋白質(zhì)，回收效率在50-80%,能夠使用20次。Store: 2～8℃ 產(chǎn)品特點: 1. 簡單，不需要復(fù)雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）; 2. 適用于變性膠（SDS-PAGE）和非變性膠; 3. 回收率一般在50-80%之間（跟蛋白質(zhì)大小，洗脫時間相關(guān)）; 4. 跟后續(xù)的實驗兼容，包括2-D電泳、質(zhì)譜測序等。 編號 包裝 價格 產(chǎn)地 BSP062 20 preps 360 生工 |
4樓2011-03-06 15:41:44
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