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liulanhua

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[交流] 【求助/交流】PBS緩沖溶液高溫滅菌后怎么變渾濁了呢？

按照《分子克隆》上配制的PBS緩沖溶液，經(jīng)高溫滅菌后變渾濁了，瓶底有析出物怎么回事？有遇到這種情況的嗎？

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1樓 2011-03-08 21:09:38

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jhu132llh

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liulanhua(金幣+1): 2011-03-09 18:20:00

是的，
按照分子克隆實驗指南的配方配出來的PBS高壓滅菌是會有沉淀的，
原因在于PH會發(fā)生微量改變，但是不會明顯影響使用，
這個問題曾經(jīng)困擾我們實驗室很長時間，
過濾除菌就好了

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14樓2011-03-09 17:42:24

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前幾天剛遇到過。完全按照分子克隆的配方。當(dāng)時百思不得其解，又急著用，那個急啊

后來有人告訴我NaCl不好了。換了NaCl就好了，囧

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18樓2013-03-20 14:20:24

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wangleisdnu

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liulanhua(金幣+1): 2011-03-09 10:45:57

did you measure ph value?

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2樓2011-03-08 21:22:34

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cjl2fl

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liulanhua(金幣+1): 2011-03-09 10:46:06

一種是高溫部分分解，但很少的。
最大的問題在于高溫滅菌后，溶液的PH會改變

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3樓2011-03-08 23:11:34

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zml2006009

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liulanhua(金幣+1): 2011-03-09 10:46:12

沒遇見過，ph是個問題，有些磷酸氫二鈉是帶12個結(jié)晶水的，所以最后母液的體積比要變.還有這些溶質(zhì)都溶解了嗎？估計也有可能是后者的原因。

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4樓2011-03-08 23:34:09

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wuyucool

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liulanhua(金幣+1): 2011-03-09 10:46:16

室溫放一段時間應(yīng)該就澄清了

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5樓2011-03-09 09:22:30

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liulanhua

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Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-08 21:22:34:
did you measure ph value?

滅菌之前調(diào)的pH是7.4

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6樓2011-03-09 10:47:05

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liulanhua

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Originally posted by zml2006009 at 2011-03-08 23:34:09:
沒遇見過，ph是個問題，有些磷酸氫二鈉是帶12個結(jié)晶水的，所以最后母液的體積比要變.還有這些溶質(zhì)都溶解了嗎？估計也有可能是后者的原因。

滅菌前使溶解了的�，F(xiàn)在在室溫放了幾天了，搖晃瓶子后瓶底還是有未溶的東西

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7樓2011-03-09 10:49:18

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liulanhua

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Originally posted by wuyucool at 2011-03-09 09:22:30:
室溫放一段時間應(yīng)該就澄清了

你遇見過這種情況？現(xiàn)在在室溫放了幾天了，搖晃瓶子后瓶底還是有未溶的東西

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8樓2011-03-09 10:49:58

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zml2006009

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那配母液的水是雙蒸水嗎？溶解一般也是要加熱（微波或是水浴）。

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9樓2011-03-09 15:15:40

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王庭

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★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流

我們以前自己配制的時候也遇到過這種情況，不過后來直接買袋裝的PBS粉，直接溶于雙蒸水滅菌就可以用的那種就沒遇到過這種情況，但是在實驗室靜置一段時間后又會出現(xiàn)類似沉淀現(xiàn)象，不過可以用的說~

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10樓2011-03-09 15:20:47

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wangleisdnu

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★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流

1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.

this is the receipt what i used
in my hand there was no problem.
is there some difference with yours

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11樓2011-03-09 15:22:59

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liulanhua

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Originally posted by 王庭 at 2011-03-09 15:20:47:
我們以前自己配制的時候也遇到過這種情況，不過后來直接買袋裝的PBS粉，直接溶于雙蒸水滅菌就可以用的那種就沒遇到過這種情況，但是在實驗室靜置一段時間后又會出現(xiàn)類似沉淀現(xiàn)象，不過可以用的說~

可以用就好，那用之前是不是應(yīng)該再加熱溶解下��？

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12樓2011-03-09 17:01:20

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liulanhua

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Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-09 15:22:59:
1x PBS
8 g NaCl
0.2 g KCl
1.44 g Na2HPO4
0.24 g KH2PO4

in 800 ml of distilled H2O.

Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.

this is the receipt wha ...

我實驗室一直用的是娃哈哈純凈水，pH值在6左右，我配PBS溶液調(diào)pH到7.4是需要加堿的，加的是NaoH，這樣配可以嗎？

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13樓2011-03-09 17:05:57

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liulanhua

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Originally posted by jhu132llh at 2011-03-09 17:42:24:
是的，
按照分子克隆實驗指南的配方配出來的PBS高壓滅菌是會有沉淀的，
原因在于PH會發(fā)生微量改變，但是不會明顯影響使用，
這個問題曾經(jīng)困擾我們實驗室很長時間，
過濾除菌就好了

謝啦！不影響使用就好！

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15樓2011-03-09 18:20:43

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luoleihao

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我也遇到相同問題，我用的Sigma的PBS，高壓滅菌也出現(xiàn)渾濁，而且渾濁的溶液不復(fù)溶。后來是通過過濾滅菌的。不知道這些混濁物是什么東西析出來了，沒深究。在這里也向高手求教，謝謝。

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16樓2011-03-09 22:24:05

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xifang8231

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我們用的 PBS緩沖溶液也出現(xiàn)了沉淀現(xiàn)象，一直也不知道這些沉淀是什么，到底是怎么產(chǎn)生的，看了一些說是長得菌不知道是不是，也沒能證明

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17樓2011-12-14 09:12:59

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LYforever

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我現(xiàn)在也遇到這個問題，請問樓主你后來怎么解決的？

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19樓2015-12-30 19:11:36

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我的出現(xiàn)白色沉淀后，pH從7.40降到6.96，過濾后降到6.84，會影響使用嗎？還是不高溫高壓滅菌，直接放在4度的冰箱好一些嗎？

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20樓2016-12-30 12:41:06

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