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草影花飄新蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】NF-κB用什么方法測比較好？ 已有9人參與
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| 我是一個藥理學(xué)碩士生，想測大鼠腹主動脈上的NF-κB指標(biāo)，我看很多國內(nèi)文獻(xiàn)上都是用免疫組化的方法測的，國外的文獻(xiàn)基本上都是用Western Blotting測的，我聽人說免疫組化是半定量的方法，染色出來的切片效果會不太好，而Western Blotting是定量方法，但價格昂貴，老板不讓用，請問我應(yīng)該選什么方法比較適合呢？ |
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xhjggl
木蟲 (正式寫手)
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
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可以用上海生工的試劑盒，再做WESTERN BLOT 細(xì)胞核蛋白/漿蛋白抽提試劑盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 產(chǎn)品說明：本試劑盒用于從哺乳動物組織和培養(yǎng)細(xì)胞中提取核蛋白和胞質(zhì)蛋白，提取制備過程簡便。制備的核蛋白和胞漿蛋白能保持天然活性，并且純度較高。提取的蛋白可用于進(jìn)一步的轉(zhuǎn)錄因子活性分析、凝膠阻滯實驗(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性測定等后續(xù)蛋白質(zhì)研究，可以每次從1×107個培養(yǎng)細(xì)胞或200mg 組織中提取所需要的蛋白質(zhì)，可以使用50次。儲存條件：2-～8℃。 產(chǎn)品特點： 1．最大限度保持蛋白質(zhì)活性，可以用于EMSA，Pull down,Enzyme activity assay等實驗； 2．整個操作過程只需要一個小時左右； 3．即可以用于培養(yǎng)細(xì)胞（50x107個），有可以用于動物組織（50x200mg）蛋白質(zhì)的提��； 4．避免蛋白酶對蛋白質(zhì)的降解，保持蛋白質(zhì)的完整性和天然活性； 5．可以同時處理多個樣品。 編號 包裝 價格 產(chǎn)地 |
7樓2011-04-01 21:40:39
2樓2011-03-11 19:16:54
草影花飄
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3樓2011-03-14 22:49:33
pier_829
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NF-kappaB 最好的方法是EMSA，這是最經(jīng)典的，因為可以測出NF-kappaB的活性 現(xiàn)在也有很多的文獻(xiàn)用的是western-blot的方法，但是因為NF-kappaB是一個核轉(zhuǎn)錄因子，所以需要分別測細(xì)胞質(zhì)蛋白和細(xì)胞核蛋白中的表達(dá)量 至于elisa吧，NF-kappaB的盒子現(xiàn)在也有了，但是我自己沒做過，不好說，但是肯定價格比較貴 免疫組化的話結(jié)果比較主觀，但是陽性結(jié)果也不是那么好做出來的 |
4樓2011-03-29 14:24:04
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