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[交流]
【求助】羧基修飾的磁性納米和-氨基適配體反應(yīng)條件
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請(qǐng)教各位大俠: 用羧基修飾的磁性納米顆粒與氨基修飾的適配體反應(yīng)?吹接形墨I(xiàn)用EDC,有用NHS,到底用那個(gè)好?還是一起用,濃度怎樣?謝謝! |
Aptamer_Biosensor | 微納材料 | 與課題相關(guān) | 納米顆粒的表面修飾 |
羧基活化EDC|DCC,NHS |
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金蟲(chóng) (小有名氣)
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EDC是用來(lái)活化羧基的,NHS是和EDC活化的中間體反應(yīng)形成活性NHS酯的,這個(gè)酯可以和氨基反應(yīng)形成酰胺。 用不用NHS就是所謂的一步法和兩步發(fā)的區(qū)別。 一步法就是羧基EDC活化后直接和氨基反應(yīng)。 兩步法救治羧基EDC活化后先和NHS反應(yīng)形成NHS酯,再NHS酯喝氨基反應(yīng)。NHS酯比較穩(wěn)定。 到底是用一步法還是兩步法是要看你的體系要求。 |
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謝謝!有點(diǎn)明白了,如果是兩步法,是不是也要先活化羧基,再加NHS呢?看到有人先加了NHS,說(shuō)是等羧基活化后再和氨基反應(yīng),這種解釋是不是不對(duì)?或者說(shuō)兩步法反應(yīng)還是應(yīng)該先加EDC活化羧基,再加NHS,這兩個(gè)藥品加入順序不同是不是也會(huì)影響到反應(yīng)結(jié)果呢?一般這種反應(yīng)是不是時(shí)間都很長(zhǎng),8小時(shí)以上,文獻(xiàn)直接寫(xiě)反應(yīng)一晚上,有點(diǎn)疑惑?(我的體系里面有DNA鏈,保溫37度反應(yīng)沒(méi)有問(wèn)題吧)謝謝您,請(qǐng)?jiān)僦更c(diǎn)一下,好嗎? |
金蟲(chóng) (小有名氣)
| 先加EDC還是先加NHS無(wú)所謂的。在bioconjugate這本書(shū)里講的很詳細(xì)的。羧基被EDC活化完后的中間體在體系里是不怎么穩(wěn)定的,如果體系里有氨基的話就會(huì)和氨基反應(yīng),沒(méi)有氨基的話也會(huì)和水反應(yīng)回到羧基的,如果加入NHS的話,中間體和NHS反應(yīng)形成NHS酯,這個(gè)酯就比較穩(wěn)定的,也是還可以和氨基反應(yīng)的。 |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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參考微米納米板塊,有edc和nhs的使用說(shuō)明 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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