hero_wang

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[交流] 【求助】藥食兩用植物的提取物的羥基自由清楚率測定問題，大俠進(jìn)來幫幫

測定提取物的抗氧化性，正在測定其中羥基自由基，采用水楊酸法測定，用紫外來測定反應(yīng)后的吸光值。根據(jù)文獻(xiàn)方法，按步驟來做，多次實驗，同樣濃度的物質(zhì)，每次做出的吸光度差距很大，甚至結(jié)果除負(fù)的清除率。即使是空白樣，吸光度測出來也有較大的差距。試劑已經(jīng)檢查清楚，硫酸亞鐵，水楊酸都是現(xiàn)配的。步驟順序，1.樣品2.硫酸亞鐵3.水楊酸4.雙氧水。樣品濃度為1mol/ml,硫酸亞鐵為9mmol/l,水楊酸為9mol/l,雙氧水為0.03%。水浴37度反應(yīng)30分鐘，吸光度在510NM下測定。
我不知道還有哪些細(xì)節(jié)沒做到。。。求教啊

我都白做了2個月了，有7個樣品，每做次實驗就要花費(fèi)半天，但還是沒有實質(zhì)性進(jìn)展。有些樣品測定出有清除率的，但是下一次就又變負(fù)的了。無語。。。

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1樓 2011-03-18 10:17:14

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hero_wang

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不知道的也頂下，湊點(diǎn)人氣啊

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2樓2011-03-18 13:45:44

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anjinghebust

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hero_wang(金幣+1):謝謝參與

結(jié)果與儀器條件也有關(guān)系。我們有時也遇到這種情況！

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3樓2011-03-18 14:34:51

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huangxing45

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hero_wang(金幣+2): 2011-03-19 11:57:01

我想問下你的提取物中主要有哪些成分，是不是多酚類？
我最近也是用水楊酸法做的，方法如下：1ml 1.5mMFeSO4, 0.7ml6mMH2O2,0.3ml 20mM水楊酸，1ml 樣品，37度水浴1小時，562nm測吸光值。做的效果還行。
我之前也是糾結(jié)了2星期，后來放棄。不是所有的方法體系都適合你的樣品，所以做不出來的時候就換其它的方法，畢竟抗氧化的方法很多。

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5樓2011-03-19 08:36:51

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xdz1978

至尊木蟲 (文壇精英)

★
hero_wang(金幣+1):謝謝參與

你這個樣品不適合做羥基自由基，可以考慮換個體系，如超氧自由基、DPPH等

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6樓2011-03-19 09:23:49

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Originally posted by mwy_jeyp at 2011-03-18 15:03:04:

樣品沒有經(jīng)過液相，文獻(xiàn)查閱是有黃酮類化合物，打算做的是比較全面的抗氧化測定，DPPH，OH,還原力，抗脂化也做的，以前用過鄰二氮菲法，效果也不理想，實驗室常規(guī)設(shè)備就是紫外，沒有熒光分析儀，所以就一直用紫外分光分度法萊測定。

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7樓2011-03-19 11:54:55

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huangxing45

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hero_wang(金幣+2): 2011-03-19 19:59:45

還可以做下還原能力，金屬離子螯合能力

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8樓2011-03-19 13:46:08

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jjwl_rscn

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打醬油的

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9樓2011-03-19 16:09:20

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Originally posted by hero_wang at 2011-03-19 11:54:55:
樣品沒有經(jīng)過液相，文獻(xiàn)查閱是有黃酮類化合物，打算做的是比較全面的抗氧化測定，DPPH，OH,還原力，抗脂化也做的，以前用過鄰二氮菲法，效果也不理想，實驗室常規(guī)設(shè)備就是紫外，沒有熒光分析儀，所以就一直用紫 ...

下星期開始做還原力吧，羥基自由基不知道如何是好，不知道加入穩(wěn)定劑是不是會好點(diǎn)

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10樓2011-03-19 20:05:07

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zzqbaidu

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

請問是咋解決的啊我的經(jīng)常也是負(fù)值。。。

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11樓2012-09-19 18:07:55

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簡單回復(fù)

mwy_jeyp4樓

2011-03-18 15:03 回復(fù)

hero_wang(金幣+1):謝謝參與

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