版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

返回列表

當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖

ybQuan

金蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 1547.9
帖子: 1006
在線: 255.9小時(shí)
蟲號(hào): 828492

[交流] 【求助/交流】關(guān)于分子克隆的技術(shù)問(wèn)題，很糾結(jié)！

本人在做昆蟲線粒體基因COII的克隆，有一個(gè)問(wèn)題總是偶爾出現(xiàn)。
鑒定為陽(yáng)性的克隆菌液測(cè)序后，有的是正常的，700多片段，正反測(cè)序結(jié)果都能找到上下游引物，結(jié)果沒(méi)問(wèn)題。
但是有的菌液只能在正向或者反向測(cè)序中分別找到一條引物，另一條引物找不到。
拼接后壁正常的片段多出幾百堿基，插在正常片段的中間。剪切下來(lái)BLAST后發(fā)現(xiàn)這段是質(zhì)粒的片段！
為什么會(huì)這樣的(⊙o⊙)？
是我操作中污染了還是測(cè)序中出現(xiàn)問(wèn)題？
哪位大蝦能解釋一下？
灰常 3ks and u 能領(lǐng)到BB

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有208人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)
留學(xué)--博士招生已經(jīng)有16人回復(fù)
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限已經(jīng)有4人回復(fù)
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑已經(jīng)有0人回復(fù)

» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

有機(jī)會(huì)調(diào)劑北科大冶金技術(shù)史專業(yè)，很糾結(jié)，大家給點(diǎn)建議！已經(jīng)有57人回復(fù)
糾結(jié)中，還得選擇面上（關(guān)于青年-面上連續(xù)申報(bào)問(wèn)題）已經(jīng)有15人回復(fù)
現(xiàn)在有個(gè)問(wèn)題很糾結(jié)啊，關(guān)于公派和考博，有人來(lái)幫幫忙嘛？已經(jīng)有7人回復(fù)
分子克隆遇到了問(wèn)題已經(jīng)有6人回復(fù)
問(wèn)一個(gè)很糾結(jié)的問(wèn)題已經(jīng)有16人回復(fù)
【問(wèn)題求助】三八節(jié)和家人討論結(jié)婚事宜，很糾結(jié)…… 已經(jīng)有15人回復(fù)
【求助】關(guān)于間苯二胺的使用，內(nèi)心很糾結(jié) 已經(jīng)有24人回復(fù)
【求助】一個(gè)對(duì)我來(lái)說(shuō)很糾結(jié)的問(wèn)題已經(jīng)有12人回復(fù)
【經(jīng)驗(yàn)分享】有個(gè)問(wèn)題很糾結(jié)：我算不算言而無(wú)信的小人啊？已經(jīng)有34人回復(fù)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2011-03-24 09:34:37

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

ybQuan

金蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 1547.9
帖子: 1006
在線: 255.9小時(shí)
蟲號(hào): 828492

引用回帖:

Originally posted by 2140061 at 2011-03-24 10:04:53:
污染了吧

能具體點(diǎn)不？

這點(diǎn)我知道

贊一下

回復(fù)此樓

3樓2011-03-24 10:38:39

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

查看全部 8 個(gè)回答

zhangxn2010

木蟲 (著名寫手)

MolEPI: 1
應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
金幣: 2450.9
帖子: 2880
在線: 284小時(shí)
蟲號(hào): 972619

★
ybQuan(金幣+1):謝謝參與
ybQuan(金幣+1): 謝謝 2011-03-24 13:02:52

懷疑是酶切的時(shí)候把載體也切了，同目的基因連接到一起了。
再做一遍吧

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

4樓2011-03-24 10:59:05

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

ybQuan

金蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 1547.9
帖子: 1006
在線: 255.9小時(shí)
蟲號(hào): 828492

引用回帖:

Originally posted by zhangxn2010 at 2011-03-24 10:59:05:
懷疑是酶切的時(shí)候把載體也切了，同目的基因連接到一起了。
再做一遍吧

謝謝你了
不過(guò)我沒(méi)有做酶切，直接送菌液測(cè)序。如果他們測(cè)序要做沒(méi)切的話可能是測(cè)序的問(wèn)題，就不是我克隆的問(wèn)題了吧

贊一下

回復(fù)此樓

5樓2011-03-24 13:03:50

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

jiangzhiang

鐵桿木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 11012.1
帖子: 743
在線: 169.8小時(shí)
蟲號(hào): 927289

★
ybQuan(金幣+1):謝謝參與

是不是反向插入載體了？要不你試試把上游引物當(dāng)下游引物，下游引物當(dāng)上游引物再找找，不知道行不行

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

6樓2011-03-24 13:26:26

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

查看全部 8 個(gè)回答

普通表情龍兔虎貓高級(jí)回復(fù) (可上傳附件)

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 調(diào)劑310 +6	溫柔的晚安 2026-03-25	7/350	2026-03-28 16:04 by qq2000
[考研] 275求調(diào)劑 +10	Micky11223 2026-03-25	14/700	2026-03-28 15:48 by Micky11223
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求調(diào)劑 +4	0857求調(diào)劑. 2026-03-24	5/250	2026-03-28 13:45 by 求知若渴lz
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +7	Li李魚 2026-03-26	7/350	2026-03-28 08:01 by baoball
[考研] 085701環(huán)境工程求調(diào)劑 +9	多久上課 2026-03-27	9/450	2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +6	1428151015 2026-03-27	6/300	2026-03-28 03:51 by fmesaito
[考研] 266求調(diào)劑 +11	陽(yáng)陽(yáng)哇塞 2026-03-27	12/600	2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 272求調(diào)劑 +7	腳滑的守法公民 2026-03-27	7/350	2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分求調(diào)劑 +9	vv迷 2026-03-22	9/450	2026-03-27 15:59 by 不吃魚的貓
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +10	A-哆啦Z夢(mèng) 2026-03-23	16/800	2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 一志愿211，335分，0856，求調(diào)劑院校和導(dǎo)師 +4	傾____蕭 2026-03-27	5/250	2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 315調(diào)劑 +4	0860求調(diào)劑 2026-03-26	5/250	2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3	Russ_ss 2026-03-25	5/250	2026-03-27 10:49 by 陸小果畫大餅
[考研] 調(diào)劑 +4	柚柚yoyo 2026-03-26	4/200	2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 【雙一流院校新能源、環(huán)境材料，材料加工與模擬招收大量調(diào)劑】 +4	Higraduate 2026-03-22	8/400	2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 334分一志愿武理材料求調(diào)劑 +4	李李不服輸 2026-03-26	4/200	2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 340求調(diào)劑 +5	話梅糖111 2026-03-24	5/250	2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 336化工調(diào)劑 +4	王大坦1 2026-03-23	5/250	2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！ +4	酥酥魚.. 2026-03-21	4/200	2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 308求調(diào)劑 +3	墨墨漠 2026-03-21	3/150	2026-03-22 16:54 by i_cooler