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鬼筆壞壞新蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】怎么做都提不出DNA，請高手幫一下忙嘍�。。�！ 已有23人參與
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怎么做都提不出DNA，請高手幫一下忙嘍�。。。� 我是從青霉菌里提的，開始用的SDS法，液氮研磨+500ul抽提緩沖液65℃水浴1h后，12000離心10min，加兩次氯仿：異戊醇（24：1）后離心10Min,12000收集上清，加等體積異丙醇-20放置30min以上，13500離心，用75%乙醇洗無菌風吹干后加無菌水溶的，結(jié)果跑電泳只有RNA。然后做了好多次都這樣。又換的氯化芐法，（液氮研磨0.1g+500ul緩液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化芐，50℃，1h）做這個我連醋酸鈉PH都調(diào)到5.2了，結(jié)果還是沒有。就崩潰了,麻煩高手給指導(dǎo)一下�。�！ [ Last edited by 1949stone on 2011-4-21 at 12:54 ] |
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1949stone(金幣+1): 有理 2011-04-21 12:53:50
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2樓2011-03-28 20:00:30
河外生命
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3樓2011-03-28 21:39:19
鬼筆壞壞
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回復(fù)：我是從青霉菌里提的，開始用的SDS法，液氮研磨+500ul抽提緩沖液65℃水浴1h后，12000離心10min，加兩次氯仿：異戊醇（24：1）后離心10Min,12000收集上清，加等體積異丙醇-20放置30min以上，13500離心，用75%乙醇洗無菌風吹干后加無菌水溶的，結(jié)果跑電泳只有RNA。然后做了好多次都這樣。又換的氯化芐法，（液氮研磨0.1g+500ul緩液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化芐，50℃，1h）做這個我連醋酸鈉PH都調(diào)到5.2了，結(jié)果還是沒有。就崩潰了,麻煩高手給指導(dǎo)一下�。�！ |
4樓2011-03-29 09:12:05
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5樓2011-03-29 09:14:16
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回復(fù)：我是從青霉菌里提的，開始用的SDS法，液氮研磨+500ul抽提緩沖液65℃水浴1h后，12000離心10min，加兩次氯仿：異戊醇（24：1）后離心10Min,12000收集上清，加等體積異丙醇-20放置30min以上，13500離心，用75%乙醇洗無菌風吹干后加無菌水溶的，結(jié)果跑電泳只有RNA。然后做了好多次都這樣。又換的氯化芐法，（液氮研磨0.1g+500ul緩液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化芐，50℃，1h）做這個我連醋酸鈉PH都調(diào)到5.2了，結(jié)果還是沒有。就崩潰了,麻煩高手給指導(dǎo)一下�。�！ |
6樓2011-03-29 09:14:44
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9樓2011-03-29 22:24:50
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