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[交流]
【求助/交流】請問大家如何培養(yǎng)hFOB1.19的��？
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請問各位版友，大家如何培養(yǎng)這株細胞的？ 細胞是從中科院上海細胞庫購買的hFOB1.19 我目前的培養(yǎng)方式是按照ATCC上面給的方法：F12: DMEM=1:1, 10%FBS, 0.3mg/ml G418, 34degree。 感覺我凍存了一次之后，細胞狀態(tài)就開始下滑，增殖的速度減慢，而且細胞表面有不少微小的黑點，我不能確定是否染菌，因為細胞液一直都是澄清的。 之前是兩天換液一次，后來改為每天都換液，也不見改善。 我換液的時候一般都有用PBS清洗殘余培養(yǎng)基，不知道大家有沒有這個習慣。 請問有培養(yǎng)過的同學，你們有在這株細胞的培養(yǎng)基中加雙抗嗎？還是有什么其他的注意事項，請一定不吝指教。謝謝：） [ Last edited by fancysea on 2011-3-29 at 13:22 ] |
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★ ★ ★ ★
fancysea(金幣+1):謝謝參與
lstt09nk(金幣+3): 很詳細， 2011-03-30 09:51:10
fancysea(金幣+5): 太感謝你了：） 2011-03-30 20:34:25
fancysea(金幣+1):謝謝參與
lstt09nk(金幣+3): 很詳細， 2011-03-30 09:51:10
fancysea(金幣+5): 太感謝你了：） 2011-03-30 20:34:25
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這株細胞不太好養(yǎng)，換液太頻繁無助于細胞狀態(tài)改善，有的時候反而不利。 換液前用pbs洗也沒啥道理。 好像這個細胞帖壁不是太牢，換液的時候要小心。 抗生素對細胞生長基本沒影響，加不加兩可。 骨細胞不要種得太滿也不要太稀。黑點一般不是染菌。 如果有支原體或者衣原體污染倒是會讓細胞狀態(tài)變差，而且不染色也看不出污染。嘗試用hochest染一下看，以便確定。 |
2樓2011-03-30 09:13:35
3樓2011-03-30 21:08:26
4樓2011-03-31 09:38:55
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