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[交流]
【求助/交流】基因序列的分析 已有5人參與
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我克隆了一個(gè)基因的cDNA 全長(zhǎng)怎樣才能知道以下這些信息? 以下是某個(gè)基因的信息,是個(gè)例子: 推測(cè)該基因包括1 638 bp的開(kāi)放讀碼框( Open read ing frame, ORF) , 42 個(gè)堿基的5非翻譯區(qū)( 5un translated reg ion, 5UTR) , 365個(gè)堿基的3非翻譯區(qū) ( 3untranslated reg ion, 3UTR) , 編碼1個(gè)545個(gè)氨 基酸的多肽, 推測(cè)的分子量為60 400 |
木蟲 (正式寫手)
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樓主一帖兩發(fā),我也跟你一帖兩回。 樓主說(shuō)的問(wèn)題其實(shí)應(yīng)該就是ORF Find和氨基酸序列分析。首先如果你拿到的是cDNA序列,你可以直接用NCBI的ORF Finder對(duì)你的序列進(jìn)行分析,找到正確的讀碼框。 ORF Finder: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/gorf.html 當(dāng)然另外還有很多離線軟件可以做這個(gè)工作,不過(guò)你要的序列分析也不是很復(fù)雜,ORF Finder完全可以了。 找到正確讀碼框后,一般說(shuō)來(lái)cDNA的正確讀碼框上第一個(gè)ATG也就是編碼第一個(gè)Methionine的這個(gè)三聯(lián)密碼子就是你的起始密碼子,在這之前的序列就是5’非翻譯區(qū),英文叫5' untranslate region (5' UTR, 相信你聽(tīng)過(guò)這個(gè)概念) ,然后你找到你的正確讀碼框的第一個(gè)終止密碼子(UAA, UGA or UAG,在你的cDNA序列上應(yīng)該顯示TAA, TGA 或者TAG),這之后的序列是3‘非翻譯區(qū)。 至于蛋白序列的分析,你找到正確讀碼框之后,把這個(gè)正確讀碼框編碼的氨基酸序列在網(wǎng)上隨便找一個(gè)氨基酸序列分析在線軟件,輸入進(jìn)去就可以得到預(yù)測(cè)的分子量了。 給你推薦一個(gè):http://www.bioinformatics.org/sms/ 上面這個(gè)網(wǎng)址進(jìn)去,左面是工具列表,基礎(chǔ)的生物信息學(xué)分析都能做了,包括ORF Finding和5'UTR, 3'UTR分析,包括蛋白質(zhì)分子量預(yù)測(cè),還有其他功能相信你也能用到。只是這個(gè)在線工具比較不人性化,沒(méi)有那么多復(fù)雜的顯示功能,如果你有生物信息學(xué)基礎(chǔ)那用起來(lái)就方便的多。 需要注意的是,所有預(yù)測(cè)得到的ORF,3'UTR, 5'UTR等等都是軟件預(yù)測(cè)結(jié)果,如果你要精確,還需要實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,最好就是3‘RACE 和 5’RACE。 希望能幫上你。 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

銀蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
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用NCBI上的ORF finder就行:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/gorf.html 蛋白分子量,等電點(diǎn)之類的就用ProtParam:http://au.expasy.org/tools/protparam.html |
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