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[交流]
【求助/交流】超薄切片中,植物亞細胞中的重金屬固定問題
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打算做透射電子顯微鏡(TEM),觀察植物亞細胞中重金屬鎘(Cd)的分布狀態(tài),看了一些相關文獻,有以下幾點困惑,希望得到大家的幫助: 1.Cd在植物亞細胞中會不會滲出? 2.文獻講用Na2S固定,這種方法可靠嗎? 3.植物中已經(jīng)存在重金屬了,做TEM時還要再用檸檬酸鉛之類的染色嗎? 4.有誰實驗室比較擅長做這方面的? 懇請幫助。 |
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小蟲做TEM,提供些參考意見,講的不對的還請指教: 1、Cd在植物亞細胞中會不會滲出。植物組織是切成1~3mm³的小塊,在進行超薄切片的時候還要修包埋塊,一般都是看塊中間的,lz只要在取樣的時候小心些就是,不要切到感興趣的部位。 2、Na2S固定我沒用過。植物組織固定分前固定和后固定,前固定都是用2.5%的戊二醛,后固定用1%鋨酸。當然也有其他的一些多重固定方法,視樣品材料而定,lz可以去搜一下,很多的。 3、植物TEM必須要用檸檬酸鉛和醋酸雙氧鈾雙重的染色的,因為超薄切片太薄,在電鏡下的反差弱,需要染色來加強反差。 祝lz實驗成功! |
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