版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

返回列表

本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MedEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看

» 猜你喜歡

【EI核心檢索】【第六屆】制造工程和過程國際會(huì)議(ICMEP 2017) 已經(jīng)有27人回復(fù)
關(guān)于分析方法學(xué)確證中stability的問題已經(jīng)有5人回復(fù)
地方病學(xué)/職業(yè)病學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有297人回復(fù)
關(guān)于日間精密度的問題已經(jīng)有2人回復(fù)
open算是上次嗎？已經(jīng)有3人回復(fù)
ZIF-8碳化后的顏色問題已經(jīng)有3人回復(fù)
CURRENT CANCER DRUG TARGETS雜志已經(jīng)有0人回復(fù)
一元二次方程求解已經(jīng)有2人回復(fù)

» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)

1樓 2011-04-10 22:42:10

已閱關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

ujsyangyong

鐵桿木蟲 (著名寫手)

MedEPI: 9
應(yīng)助: 157 (高中生)
金幣: 12087.9
紅花: 6
帖子: 1002
在線: 134.7小時(shí)
蟲號(hào): 471632
注冊(cè): 2007-12-02
性別: GG
專業(yè): 腦、脊髓、周圍神經(jīng)損傷及

想做什么指標(biāo)呢？

★ ★ ★ ★ ★
winzhouyun(金幣+5, EPI+1): 謝謝參與辛苦了！歡迎常來醫(yī)學(xué)版 2011-04-12 13:16:30

最重要的要看你需要進(jìn)行什么因子染色標(biāo)記了，最重要的就是一抗，二抗還有DAB
在動(dòng)物灌注固定切片染色過程中所需溶液：
4%多聚甲醛：A液：稱取40g多聚甲醛干粉，加入400ml dd H2O中，滴加少許1mol/l NaOH溶液，密封置60℃水浴，使其完全溶解。B液：稱取16.88g NaH2PO4•2H2O加入300ml dd H2O中，使其完全溶解。C液：稱取3.86g NaOH加入200ml dd H2O中，使其完全溶解。將ABC液混勻，調(diào)節(jié)pH值為7.2-7.4，定容至1000ml。4℃儲(chǔ)存?zhèn)溆�，兩周�?nèi)使用。
磷酸鹽緩沖液（PBS）：8g Nacl, 0.2g KCl, 1.56g Na2HPO4.H2O, 0.2gKH2PO4 溶解于 1L dd H2O 中。
70%、75%、80%、85%、90%、95%、梯度酒精溶液按照體積比用ddH2O稀釋。
蘇木素染液：將蘇木素 2g溶于100ml無水酒精中，硫酸鋁鉀 15g溶于100ml蒸餾水中，與100ml甘油、10ml冰醋酸加在一起，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝�，日曬四周，讓其慢慢氧化成熟后方可使用�?br /> 伊紅染液：水溶性伊紅 2.5g 用蒸餾水(少許)調(diào)成漿糊狀，加入70-75%酒精　　　　250ml邊加邊攪拌，直到徹底溶解，此時(shí)試劑有些混濁，取少許冰醋酸，加入到試劑中去，試劑逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榍辶粒术r紅色。
1%HCl酒精：向250ml 70%酒精中按（1:100）體積比加入2.5ml濃鹽酸，混勻。
大概步驟：
動(dòng)物麻醉后心臟灌注多聚甲醛固定，取肝臟后固定，石蠟包埋并切片或者冰凍切片。石蠟切片，片厚2μm。漂片水溫50℃，烘片溫度90℃。
石蠟切片脫蠟：
將石蠟切片裝上片架，置60℃烘箱干烤1h至石蠟融化，趁熱依次置于二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ、95%乙醇、90%乙醇、85%乙醇、80%乙醇、75%乙醇、70%乙醇、雙蒸水中，每道5min。
抗原熱修復(fù)（冰凍不需要）：
將脫水后的石蠟切片置于pH6.0的0.01M枸櫞酸鹽緩沖液槽中，水浴加熱至100℃維持30min，待其自然冷卻至室溫。
免疫組織化學(xué)染色：
將經(jīng)過抗原熱修復(fù)的石蠟切片平鋪在濕盒內(nèi)，滴加甲醇稀釋的3%過氧化氫溶液，室溫放置30min滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS洗滌5min×3次，滴加3%BSA封閉非特異結(jié)合位點(diǎn)，室溫放置30min，倒去多余BSA溶液，滴加以3%BSA溶液1:200稀釋的第一抗體，4℃過夜，次日晨，取出，倒去多余抗體溶液，PBS洗滌5min×3次，滴加3%BSA溶液1:200稀釋的第二抗體，37℃孵育1h，PBS洗滌5min×3次，滴加DAB顯色劑，室溫顯色，隨時(shí)觀察，適時(shí)終止顯色反應(yīng)。每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)置陽性對(duì)照及陰性對(duì)照組，陽性對(duì)照采用已知陽性切片，陰性對(duì)照采用PBS代替第一抗體。
蘇木素復(fù)染細(xì)胞核：
將免疫組化染色完畢的切片置于蘇木素染液中染色3-5min，立即取出，流水洗去多余蘇木素染液，1%HCl酒精分化3s，置流水中藍(lán)化45min。
脫水、透明、封片
將染色完畢的切片依次通過70%乙醇、75%乙醇、80%乙醇、85%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ梯度酒精脫水，二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ透明，中性樹膠封片。
如不明白，請(qǐng)短我。

[ Last edited by ujsyangyong on 2011-4-11 at 22:58 ]

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)，還是實(shí)驗(yàn)！

2樓2011-04-11 22:55:25

已閱關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

雨夜漫步

禁蟲 (正式寫手)

本帖內(nèi)容被屏蔽

3樓2011-04-11 23:10:59

已閱關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

ujsyangyong

鐵桿木蟲 (著名寫手)

MedEPI: 9
應(yīng)助: 157 (高中生)
金幣: 12087.9
紅花: 6
帖子: 1002
在線: 134.7小時(shí)
蟲號(hào): 471632
注冊(cè): 2007-12-02
性別: GG
專業(yè): 腦、脊髓、周圍神經(jīng)損傷及

引用回帖:

Originally posted by 雨夜漫步 at 2011-04-11 23:10:59:
大蝦，留一下聯(lián)系方式，非常感謝�。�

已短你

回復(fù)此樓

實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)，還是實(shí)驗(yàn)！

4樓2011-04-12 21:59:10

已閱關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主雨夜漫步的主題更新

返回列表

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分四六級(jí)已過本科山東雙非求調(diào)劑！ +3	不想理你 2026-03-16	3/150	2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 297求調(diào)劑 +9	戲精丹丹丹 2026-03-17	9/450	2026-03-21 01:49 by JourneyLucky
[考研] 354求調(diào)劑 +5	Tyoumou 2026-03-18	8/400	2026-03-21 00:35 by JourneyLucky
[考研] 287求調(diào)劑 +7	晨昏線與星海 2026-03-19	8/400	2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通專碩材料355 本科雙非求調(diào)劑 +5	西南交通專材355 2026-03-19	5/250	2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)0703化學(xué)318分，有科研經(jīng)歷，求調(diào)劑 +4	一瓶苯甲酸 2026-03-14	4/200	2026-03-20 20:36 by fen_rao
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4	Stella_Yao 2026-03-20	4/200	2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 353求調(diào)劑 +3	拉鉤不許變 2026-03-20	3/150	2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[論文投稿] 申請(qǐng)回稿延期一個(gè)月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時(shí)間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù) 10+3	wangf9518 2026-03-17	4/200	2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 320求調(diào)劑0856 +3	不想起名字112 2026-03-19	3/150	2026-03-19 22:53 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 一志愿福大288有機(jī)化學(xué)，求調(diào)劑 +3	小木蟲200408204 2026-03-18	3/150	2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3	xwt。 2026-03-19	3/150	2026-03-19 11:22 by w沐陽w
[考研] 0854，計(jì)算機(jī)類招收調(diào)劑 +3	胡辣湯放糖 2026-03-15	6/300	2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +4	張vvvv 2026-03-15	6/300	2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料工程（085601）專碩有科研經(jīng)歷三項(xiàng)國獎(jiǎng)兩個(gè)實(shí)用型專利一項(xiàng)省級(jí)立項(xiàng) +6	大火山小火山 2026-03-16	8/400	2026-03-17 15:05 by 無懈可擊111
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6	薛云鵬 2026-03-15	6/300	2026-03-17 11:05 by 學(xué)員h26Tkc
[考研] 283求調(diào)劑 +3	聽風(fēng)就是雨； 2026-03-16	3/150	2026-03-17 07:41 by 熱情沙漠
[考研] 11408 一志愿西電，277分求調(diào)劑 +3	zhouzhen654 2026-03-16	3/150	2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3	自由煎餅果子 2026-03-16	3/150	2026-03-16 14:10 by 運(yùn)氣yunqi
[考研] 080500，材料學(xué)碩302分求調(diào)劑學(xué)校 +4	初識(shí)可樂 2026-03-14	5/250	2026-03-14 21:08 by peike

亭亭五月天在线观看,亭亭五月天在线观看,国产最新av一区二区,国产 高清 中文字幕,99re热久久亚洲综合精品成人,熟妇 一区二区三区,一级做a爰片性色毛片武则天,美女的骚穴视频播放,国产美女午夜免费视频

24小時(shí)熱門版塊排行榜

雨夜漫步

» 猜你喜歡

» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)

ujsyangyong

想做什么指標(biāo)呢？

雨夜漫步

ujsyangyong

亭亭五月天在线观看,亭亭五月天在线观看,国产最新av一区二区,国产高清中文字幕,99re热久久亚洲综合精品成人,熟妇一区二区三区,一级做a爰片性色毛片武则天,美女的骚穴视频播放,国产美女午夜免费视频

想做什么指標(biāo)呢？