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[交流]
【求助】動態(tài)光散射(DLS) 折射率 吸光度
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利用環(huán)糊精和偶氮苯衍生物的主客體相互作用組裝囊泡 測DLS時(shí)要求給出材料的折射率(RI)及吸光度(Absorbtion) 但是環(huán)糊精和偶氮苯的RI及A都未知 該怎么測試呢 查不到beta-環(huán)糊精及偶氮苯衍生物的RI及A啊 我隨便定義了一下 影響能有多大呢 求高人指點(diǎn) |
動態(tài)光散射 |
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對于有吸收的物質(zhì)測量光散射是比較麻煩的一件事 不知道你用DLS是想干什么?如果是得到具體的粒徑數(shù)值,那么沒辦法你必須知道折光指數(shù)以及體系的粘度,否則得到的粒徑就不可信 但是如果你是比較在同樣溶劑環(huán)境下不同組裝體的相對大小,那就可以不用知道折光指數(shù)和粘度也能比較。DLS測的不是光強(qiáng)而是光強(qiáng)的擾動,最后儀器給你擬合出來的數(shù)值是一個(gè)松弛時(shí)間,而這個(gè)值等于擴(kuò)散系數(shù)乘以q(散射矢量)的平方,這個(gè)散射矢量和折光指數(shù)及角度有關(guān),如果不知道折光指數(shù)就無法確定q也就無法得出準(zhǔn)確的平均擴(kuò)散系數(shù),當(dāng)然也就不可能更具stocks-Einstein方程去通過擴(kuò)散系數(shù)求得粒徑了 但是如果只是相對的比較的話是可以不用知道這些參量的,如果你用DLS做一些其他方便的研究如多級運(yùn)動等等,有些情況下就大可不必知道這些參數(shù) |
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動態(tài)光散射儀的工作原理 動態(tài)光散射技術(shù)(dynamic light scattering,DLS)是指通過測量樣品散射光強(qiáng)度起伏的變化來得出樣品顆粒大小信息的一種技術(shù)。之所以稱為“動態(tài)”是因?yàn)闃悠分械姆肿硬煌5刈霾祭蔬\(yùn)動,正是這種運(yùn)動使散射光產(chǎn)生多普勒頻移。動態(tài)光散射技術(shù)的工作原理可以簡述為以下幾個(gè)步驟:首先根據(jù)散射光的變化,即多普勒頻移測得溶液中分子的擴(kuò)散系數(shù)D,再由D=KT/6πηr可求出分子的流體動力學(xué)半徑r,(式中K為玻爾茲曼常數(shù),T為絕對溫度,η為溶液的粘滯系數(shù)),根據(jù)已有的分子半徑-分子量模型,就可以算出分子量的大小。 光在傳播時(shí)若碰到顆粒,一部分光會被吸收,一部分會被散射掉。如果分子靜止不動,散射光發(fā)生彈性散射時(shí),能量頻率均不變。但由于分子不停地在做雜亂無章的布朗運(yùn)動,所以,當(dāng)產(chǎn)生散射光的分子朝向監(jiān)測器運(yùn)動時(shí),相當(dāng)于把散射的光子往監(jiān)測器送了一段距離,使光子較分子靜止時(shí)產(chǎn)生的散射光要早到達(dá)監(jiān)測器,也就是在監(jiān)測器看來散射光的頻率增高了;如果產(chǎn)生散射的分子逆向監(jiān)測器運(yùn)動,相當(dāng)于把散射光子往遠(yuǎn)離監(jiān)測器的方向拉了一把,結(jié)果使散射光的頻率降低。日常生活中,但我們聽到救護(hù)車由遠(yuǎn)而近時(shí),聲音的頻率越來越高,也是同樣的道理。實(shí)際上我們可以根據(jù)聲音頻率變化的快慢來判斷救護(hù)車運(yùn)動的速度。 光散射技術(shù)就是根據(jù)這種微小的頻率變化來測量溶液中分子的擴(kuò)散速度。由D=KT/6πηr可知,當(dāng)擴(kuò)散速度一定時(shí),由于實(shí)驗(yàn)時(shí)溶劑一定,溫度是確定的,所以擴(kuò)散的快慢只與流體動力學(xué)半徑有關(guān)。蛋白質(zhì)多方面的性質(zhì)都直接和它的大小相關(guān)。因此,光散射廣泛應(yīng)用與蛋白質(zhì)及其它大分子的理化性質(zhì)研究。 |

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