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[交流]
【求助/交流】怎么鑒別植物細(xì)胞是活著還是死了，有任何想法的都請不吝指教，謝謝
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我這邊需要鑒定木頭是否經(jīng)過了80度以上的熱處理。我想處理后植物細(xì)胞肯定死了，所以想通過鑒定植物細(xì)胞是活著還是死了的方法來判定是否經(jīng)過了6小時80度的熱處理。我們知道活著的細(xì)胞有滲透壓，死后就沒了，可不可以把部分木頭浸泡在某種顏色的溶液中，通過顯微鏡來觀察細(xì)胞內(nèi)是否有顏色來判定。 1 如果可以，請教一下一般用哪種溶液，本人不是很懂這方面的請指教。 2 如果不可以，還有什么辦法。 3 如果您有什么好辦法都可以說說，再次先說聲謝謝了。 |
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4樓2011-04-15 09:01:25
用活體染色技術(shù)鑒定植物細(xì)胞死活的方法
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zwj0420(金幣+1):謝謝參與
咸魚(金幣+3): 感謝認(rèn)真回帖交流~ 2011-04-14 20:46:01
zwj0420(金幣+5): 感謝回復(fù)，非常用心，雖然說的不是帶有纖維壁的細(xì)胞但是也有很好的參考借鑒意義，非常感謝 2011-04-14 21:56:18
zwj0420(金幣+1):謝謝參與
咸魚(金幣+3): 感謝認(rèn)真回帖交流~ 2011-04-14 20:46:01
zwj0420(金幣+5): 感謝回復(fù)，非常用心，雖然說的不是帶有纖維壁的細(xì)胞但是也有很好的參考借鑒意義，非常感謝 2011-04-14 21:56:18
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活體染色是利用某種對植物無害的染料稀溶液進(jìn)行活細(xì)胞染色的技術(shù)。中性紅是常用的活體染料之一，它是一種堿性染料，也是一種弱堿性PH指示劑，變色范圍在PH6.8—8.0之間（由紅變黃）。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細(xì)胞能大量吸收中性紅并向液泡內(nèi)排泌。由于液泡通常呈酸性反應(yīng)，因此進(jìn)入液泡的中性紅呈現(xiàn)櫻桃紅色， 在這種情況下，原生質(zhì)和細(xì)胞壁一般不著色。死細(xì)胞由于膜的選擇透性消失，液泡破壞，因此不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象。但中性紅的陽離子卻與帶有一定負(fù)電荷的原生質(zhì)及細(xì)胞核結(jié)合，使原生質(zhì)和細(xì)胞核染色。本實(shí)驗(yàn)需要如下材料和用具：洋蔥鱗莖、小麥葉片或紫鴨跖草葉片、刀片、尖頭鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、0.03％中性紅溶液、1M硝酸鉀溶液、酒精燈。實(shí)驗(yàn)步驟： 1.削取較幼嫩的洋蔥鱗片，在內(nèi)表面切割5平方毫米左右的方形切痕，用尖鑷子撕下這塊內(nèi)表皮，投入0.03％的中性紅溶液中。如用小麥葉片，表皮不易撕取，可把葉片平放載玻片上，加水蘸濕，用刀片輕輕刮去上表皮、葉肉和葉脈，只留下一層下表皮，再切割成5平方毫米的小片。 2.染色10－15分鐘后取出，用蒸餾水稍加沖洗，在低倍鏡下觀察，此時主要是細(xì)胞壁染色，原生質(zhì)和液泡不著色。 3.將制片放在自來水（PH略高于7.0）中浸泡10－15分鐘，再進(jìn)行顯微觀察，此時細(xì)胞壁完且脫色，液泡染成均勻的櫻桃紅色，細(xì)胞核和原生質(zhì)不著色。 4.將染好的表皮浸入1M的硝酸鉀溶液中，約10分鐘后取出觀察。由于鉀離子能使原生質(zhì)膨脹，發(fā)生帽狀質(zhì)壁分離，因此能清楚地看到無色透明的原生質(zhì)和染為紅色的液泡。 5.將表皮組織加熱或酒精浸泡，殺死細(xì)胞后再染色，則可看到死細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核都染上顏色，而看不到活細(xì)胞具有的液泡染色現(xiàn)象。 如將步驟3中的活染制片在酒精燈火焰上微微加熱，以殺死細(xì)胞，也可看到原生質(zhì)呈不均勻的凝膠狀，與細(xì)胞核一起被染成紅色。另外，在活染制片中仔細(xì)尋找，也可能看到個別死細(xì)胞，經(jīng)中性紅染色后其細(xì)胞核清晰可辨。 |
3樓2011-04-14 17:43:47
jhu132llh
榮譽(yù)版主 (知名作家)
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- 蟲號: 1095066
5樓2011-04-15 15:40:35
7樓2011-04-18 12:20:53
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