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凝膠柱分離多糖
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向各位請教關(guān)于用凝膠柱（G或DEAE）分離植物多糖的幾個問題： 1. 文獻上許多用凝膠柱分離時常用梯度的NaCl作流動相，這種流動相得作用是什么？這種流動相是與G系列還是DEAE型還是兩者皆可？ 2. G系列分離的分子量一般有一定范圍，比如1000-10000，那么小于，大于和在范圍中的三種類型的物質(zhì)他們色譜行為是怎樣的？是大于的很快呈尖峰下來，小于的和范圍之中的物質(zhì)混合下來嗎？那為什么會有這個適用的范圍下限呢？ 3. 流份用紫外檢測作圖有單峰出現(xiàn)的流份就可以看做是單一的多糖了嗎？ 謝謝大家！ [ Last edited by 完美理想國 on 2011-4-18 at 22:25 ] |
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
完美理想國(金幣+3): 謝謝交流！ 2011-04-24 10:16:19
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
完美理想國(金幣+3): 謝謝交流！ 2011-04-24 10:16:19
| 咋倆做的還挺像的，我說說我的看法吧，在用凝膠色譜的時候，由于凝膠分子里還有微量的羧基，因此會有一定的離子交換作用，用Nacl做洗脫液，是因為在一定的離子強度下，這種離子交換作用就很微弱了，可以使樣品按照分子量的大小依次流出。用DEAE的時候，由于是離子交換色譜，靠的就是在不同的離子強度情況下，多糖與功能基團的結(jié)合情況不同來分離樣品的。至于分子量，如果樣品的分子量太大，那么凝膠柱對樣品就是全排阻，比如，G-100的分離范圍時4000-100000，多糖分子就都不會進入凝膠顆粒里面，直接由外面流出了比如，G-100的分離范圍時4000-100000，那么，20萬和三十萬的多糖，由于都不能進到凝膠顆粒里面，就都會從顆粒間隙流出，那么他們流出所花的時間久事一樣的，不能被分離。做出單峰，也不能認為是純品，只能說在這種分離情況下他們不能被分離，還要做其他的實驗 |
2樓2011-04-23 21:21:31
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3樓2011-11-05 21:56:18
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