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[求助]
急求！設(shè)計(jì)一個(gè)生化分子的實(shí)驗(yàn)方法
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1． 科學(xué)家新發(fā)現(xiàn)了某編碼蛋白質(zhì)的內(nèi)源基因X，已得到X的完整基因序列。 A．請(qǐng)從序列入手分析其表達(dá)產(chǎn)物的功能，請(qǐng)列出可采用的方法及步驟。（4分） B．上述分析表明X可能編碼了一個(gè)DNA結(jié)合蛋白，那么它可能具有什么結(jié)構(gòu)，試舉3種。（6分） C．請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證X是否是DNA結(jié)合蛋白（10分） 2．蛋白A和蛋白B，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究它們之間的相互作用（10分），假設(shè)發(fā)現(xiàn)A與B相互作用，設(shè)計(jì)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)尋找蛋白A上與B作用的特定區(qū)域（10分）。 急求急求！ |
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2樓2011-04-22 13:16:37
【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+6, EPI+1): good！ 2011-04-22 17:36:38
西瓜(金幣+6, EPI+1): good！ 2011-04-22 17:36:38
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A:可以通過(guò)基因序列找出蛋白質(zhì)序列，在NCBI上以及以及序列分析網(wǎng)站，可以得到蛋白質(zhì)序列的特征結(jié)構(gòu)，從而預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的功能 B：如果是DNA結(jié)合蛋白，那么很可能是轉(zhuǎn)錄因子，轉(zhuǎn)錄因子可能的結(jié)構(gòu)有螺旋-環(huán)-螺旋，鋅指，亮氨酸拉鏈 C：EMSA，ChIP，CAST實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證是否為轉(zhuǎn)錄因子 2：蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用可以用IP（免疫沉淀）和酵母雙雜交來(lái)驗(yàn)證 具體的實(shí)驗(yàn)方法，LZ可以自己具體找一下。 |
3樓2011-04-22 17:15:33
rainwander
鐵桿木蟲(chóng) (知名作家)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 貴賓: 2.598
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- 注冊(cè): 2008-12-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
4樓2011-04-22 21:35:31
beibei9535
榮譽(yù)版主 (職業(yè)作家)
暈暈小版主~ 姑娘你好！
- MolEPI: 7
- 應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
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- 注冊(cè): 2009-05-13
- 專業(yè): 微生物學(xué)
- 管轄: 海外院所點(diǎn)評(píng)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金幣+5, EPI+1): 再接再厲！ 2011-04-23 13:14:04
dhd997(金幣+5, EPI+1): 再接再厲！ 2011-04-23 13:14:04
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啊哈哈，不知道該不該幫你呀。 這些考試題。。 題目質(zhì)量挺好的，科院的吧。 A 從序列出發(fā)，生物信息學(xué)。 NCBI核酸BLAST確定大概是什么基因。 基因轉(zhuǎn)化為氨基酸序列。軟件找到ORF（很多軟件的呀，bioedit也行） NCBI--CDD找到保守區(qū)。 差不多就知道什么功能了。呵呵 B 呵呵，這些結(jié)構(gòu)生化分子書(shū)上很多講解的，不詳細(xì)說(shuō)了。 螺旋，轉(zhuǎn)角，亮氨酸拉鏈。 C 利用酵母單雜交體系篩選DNA結(jié)合蛋白質(zhì) 一般是用利用EMSA和PCR技術(shù)結(jié)合使用。 2．蛋白A和蛋白B，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究它們之間的相互作用（10分），假設(shè)發(fā)現(xiàn)A與B相互作用，設(shè)計(jì)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)尋找蛋白A上與B作用的特定區(qū)域（10分）。 基礎(chǔ)知識(shí)吧，DNase Ⅰ敏感性分析、體外和體內(nèi)足跡分析等技術(shù)， 最常用的是Elisa... 還有很多吧，看分子書(shū)。 |
5樓2011-04-23 13:12:44
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