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[求助]
HPLC-DAD
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| 哪位大俠知道HPLC-DAD的原理，這是什么方法，怎么用，一般用在哪里 |
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leecius
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
novus(金幣+2): 說的很詳細(xì)，希望正是樓主所需！ 2011-05-07 21:03:12
歡仔(金幣+3): 謝謝 2011-05-15 12:53:57
novus(金幣+2): 說的很詳細(xì)，希望正是樓主所需！ 2011-05-07 21:03:12
歡仔(金幣+3): 謝謝 2011-05-15 12:53:57
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樓主想問的應(yīng)該是紫外單波長(zhǎng)檢測(cè)器（VWD）與紫外二極管陣列檢測(cè)器（DAD）的使用及區(qū)別吧，本人略懂皮毛，簡(jiǎn)單說一說吧。 1.VWD和DAD兩種檢測(cè)器都屬于高效液相色譜儀器的組成部分，只是兩者設(shè)計(jì)有區(qū)別，使用有差異而已； 2.VWD只能進(jìn)行某一特定波長(zhǎng)的檢測(cè)，即事先設(shè)定好某一波長(zhǎng)，然后在此波長(zhǎng)下對(duì)流經(jīng)色譜柱的樣品進(jìn)行檢測(cè)；DAD檢測(cè)器可以進(jìn)行全波長(zhǎng)檢測(cè)，一般是從190nm到400nm的范圍掃描，掃描結(jié)束后得到一張三維圖譜，坐標(biāo)分別是運(yùn)行時(shí)間、吸收值和波長(zhǎng)值，當(dāng)然你也可以從中調(diào)出任何一張波長(zhǎng)范圍在190nm到400nm的色譜圖，此三維圖對(duì)有關(guān)物質(zhì)檢查時(shí)的波長(zhǎng)選擇比較有幫助； 3.關(guān)于峰純度的問題，在DAD檢測(cè)器上，檢查某一色譜峰（A）的峰純度，首先要對(duì)A進(jìn)行恰當(dāng)?shù)姆e分，然后選擇合適的參比（分自動(dòng)和手動(dòng)，一般選自動(dòng)，特殊情況下選手動(dòng)），再選擇波長(zhǎng)范圍（210nm-400nm較合適吧，再低會(huì)有基質(zhì)的末端吸收干擾，會(huì)影響峰純度檢查的可信度，當(dāng)然這要看具體的流動(dòng)相及等梯度情況啦），之后選擇固定閾值（國(guó)家局要求在990及以上），最后點(diǎn)一下要測(cè)的主峰就可以了。我簡(jiǎn)單的說一下峰純度檢查的原理吧，是這樣的，當(dāng)要檢查某一色譜峰的峰純度（A）時(shí)，軟件會(huì)在A的起始點(diǎn)、前半中點(diǎn)、頂點(diǎn)、后半中點(diǎn)和結(jié)束點(diǎn)（共5點(diǎn)）分別取紫外全掃描圖來進(jìn)行擬合度檢查，當(dāng)擬合度大于閾值（即上述的990）時(shí)，軟件默認(rèn)為A的五個(gè)點(diǎn)都是一種物質(zhì)，即A是一種物質(zhì)的紫外吸收峰，純的，相反，當(dāng)擬合度低于閾值時(shí)，軟件默認(rèn)A的五個(gè)點(diǎn)不是一種物質(zhì)，即A是兩種或兩種以上的物質(zhì)的紫外吸收峰，不純，就要再進(jìn)行條件的優(yōu)化分開它們了。所以峰純度檢查是選擇有關(guān)物質(zhì)檢查色譜條件的重要環(huán)節(jié)之一，也就是方法的專屬性啦。 上面啰嗦了這么多，希望對(duì)大家有幫助吧，如果有不到的地方，希望大家指出更正，謝謝啦！ |
7樓2011-05-07 14:59:48
aiyixiang
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