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ybQuan金蟲 (著名寫手)
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[交流]
關(guān)于PCR的一些技術(shù)問題，歡迎交流！ 已有1人參與
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最近用在做白蟻線粒體COI基因的擴(kuò)增。開始用梯度檢驗(yàn)引物的時(shí)候效果蠻好，確定了最佳的Tm值。但是之后按照這個(gè)體系再做擴(kuò)增，有時(shí)候只有很暗的一條帶，有時(shí)候就做不出來。用幾個(gè)不同濃度的DNA模板去試驗(yàn)也是沒有結(jié)果。這是什么問題？ 一般DNA模板濃度在20ng的時(shí)候就可以做的出來，酶和dNTP的量也足夠。 另外，10*buffer放在-20°保存，用的時(shí)候取出來解凍，放進(jìn)冰箱再拿出來發(fā)現(xiàn)凍不上了，會(huì)不會(huì)失效了，可能是它影響了結(jié)果嗎？ |
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2樓2011-04-27 12:38:50
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