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saint511木蟲 (正式寫手)
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[求助]
請(qǐng)教關(guān)于透析袋及其使用
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因?qū)嶒?yàn)需要，要使用透析帶（不是透析袋），因?yàn)楹苜F，想問(wèn)一下， 透析帶一般能重復(fù)使用幾次？使用前后的處理方法？ 另外，網(wǎng)絡(luò)上有提到透析袋和透析膜兩種，好像前處理方法不同，想問(wèn)一下這兩種透析用品有什么差別？ 另外能否推薦一些透析袋廠商？最好分子量在1000-2500左右的，性價(jià)比高一點(diǎn)的吧。 |
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saint511
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8樓2011-05-02 21:38:14
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【答案】應(yīng)助回帖
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透析袋的處理 分子在半透膜間的分離是由膜兩側(cè)溶液的濃度差驅(qū)動(dòng)的，受相對(duì)于膜內(nèi)微孔尺寸的分子大小(分子質(zhì)量)的限制。微孔尺寸決定著截留分子質(zhì)量，截留分子質(zhì)量的定義是當(dāng)90%的溶質(zhì)分子可被膜截留時(shí)的分子質(zhì)量。實(shí)際某一溶質(zhì)的通透性不僅取決于分子的大小，還取決于分子的形狀、分子的水化程度及其所帶的電荷。這些參數(shù)均受溶劑的性質(zhì)、pH以及離子強(qiáng)度的影響。因此截留分子質(zhì)量只能作為參考，而不能絕對(duì)地用來(lái)預(yù)測(cè)在各種溶質(zhì)和溶劑下的透析行為。市售的透析膜孔徑范圍很大(從100Da到2 000kDa)。在透析大多數(shù)質(zhì)粒DNA和許多蛋白質(zhì)時(shí)，截留分子質(zhì)量在12000～14000Da之間比較適合。 (1)將透析管剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10～20cm)的小段，即形成透析袋。 (2)在大體積的2%(m/v)碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10 min。 (3)將透析袋用蒸餾水徹底漂洗。 (4)將透析袋置1 mmol/L EDTA(pH 8.0)中煮沸10min。 (5)待透析袋冷卻，存放于4℃，應(yīng)確保透析袋始終浸沒(méi)在液體中。 重要：從此步起用透析袋時(shí)一定要戴手套操作。 (6)在使用之前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗。 [注]也可將透析袋放在廣口瓶中充滿水，松動(dòng)瓶蓋，于20psi(1.40 kg/cm2)高壓滅菌10min代替第4步用1 mmol/L EDTA(pH8.0)煮沸10min的操作。 使用完后將透析袋浸泡在70％乙醇中以免長(zhǎng)菌。 |
9樓2011-05-03 14:55:48
saint511
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10樓2011-05-03 15:35:06
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