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考馬斯亮藍(lán)與凱氏定氮
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| 大家好,我用考馬斯亮藍(lán)法測樣品的蛋白的含量時(shí)候發(fā)現(xiàn)自己測得的結(jié)果和別人用凱氏定氮法測得的結(jié)果相差三倍,這是為什么啊 |
木蟲 (正式寫手)
小七

木蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)

| 說的不一定對,其實(shí)準(zhǔn)不準(zhǔn)都是一個(gè)參照,凱氏定氮法是原理可能是肽鏈骨架及帶有氮的側(cè)鏈,對側(cè)鏈可能就是一個(gè)估算的平均,考馬斯亮藍(lán)呢,就是測蛋白堿性基團(tuán)的,它只能和堿性基團(tuán)結(jié)合。其實(shí)準(zhǔn)不準(zhǔn)取決于你的參照,當(dāng)然,凱氏定氮法是比較早的方法,誤差確實(shí)比較大些。還有考馬斯亮藍(lán)測量的時(shí)候樣品不純的話可能也會有很大的干擾,對吸收值也有一定要求,如果樣品吸收值在1左右時(shí)比較準(zhǔn)吧 |


木蟲 (小有名氣)
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