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zxd95至尊木蟲 (著名寫手)
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[求助]
請教EHA101、EHA105、PMP90三種農(nóng)桿菌的區(qū)別
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| 目前實驗室有EHA101、EHA105、PMP90三種農(nóng)桿菌，我要轉(zhuǎn)化擬南芥和煙草，平時都用PMP90感受態(tài)，現(xiàn)在用完了，但是還有很多EHA101和EHA105農(nóng)桿菌感受態(tài)，請問蟲友們，他們?nèi)齻�的區(qū)別是什么？我可不可以使用EHA101和EHA105感受態(tài)電轉(zhuǎn)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)化擬南芥和煙草？？？ |
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xinxinxuezi
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
西瓜(金幣+3): 鼓勵 2011-05-04 18:49:15
zxd95(金幣+5): 謝謝！我們實驗室的是C58C1 pMP90。EHA105電轉(zhuǎn)后，搖菌28度、12h就搖出來了，這正常嗎?C58C1 pMP90 28度需要36h才能搖出來。 2011-05-04 21:05:01
西瓜(金幣+3): 鼓勵 2011-05-04 18:49:15
zxd95(金幣+5): 謝謝！我們實驗室的是C58C1 pMP90。EHA105電轉(zhuǎn)后，搖菌28度、12h就搖出來了，這正常嗎?C58C1 pMP90 28度需要36h才能搖出來。 2011-05-04 21:05:01
| 就我所知,PMP90不是一種農(nóng)桿菌,只是一個輔助質(zhì)粒,用于協(xié)助小質(zhì)粒轉(zhuǎn)化.你用的PMP90菌株是不是指C58C1 pMP90 或GV3101(pMP90)? 如果你轉(zhuǎn)化的是大質(zhì)粒(大于5KB),用EHA101和EHA105感受態(tài)電轉(zhuǎn)沒有問題. |
2樓2011-05-04 18:41:53
xinxinxuezi
至尊木蟲 (文壇精英)
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3樓2011-05-04 22:30:27
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| E H A 1 0 5 菌株由E H A 1 0 1 菌株改造而來，為C58型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105 (pTiBo542DTDN A ) ， 此質(zhì)粒含有v i r 基因( v i r 基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移）。PMP90的不清楚。前兩者是可以轉(zhuǎn)煙草的。詳細的可查一下相關(guān)商品說明。（https://wenku.baidu.com/view/fefce953b9d528ea80c7798b.html） |
5樓2019-04-23 09:53:50
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