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如何在沉淀過(guò)程中保護(hù)蛋白
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| 本人目前在做一個(gè)蛋白的純化，在前處理濃縮的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)乙醇和硫酸銨沉淀后全部失活，請(qǐng)問(wèn)各位，該加些什么保護(hù)劑才能使蛋白穩(wěn)定（濃度如何），蛋白含有一個(gè)鐵離子，1-3個(gè)二硫鍵 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金幣+5): 感謝交流，歡迎常來(lái) 2011-05-11 18:38:37
silicare(EPI+1): 2011-05-13 18:26:54
lstt09nk(金幣+5): 感謝交流，歡迎常來(lái) 2011-05-11 18:38:37
silicare(EPI+1): 2011-05-13 18:26:54
| 有的蛋白質(zhì)就是對(duì)乙醇和硫酸銨敏感，就像我的蛋白質(zhì)一樣，如果用乙醇去沉淀，加了9倍體積之后產(chǎn)生的沉淀只有80%的目標(biāo)蛋白質(zhì)；如果用硫酸銨，在50%飽和度下不會(huì)沉淀，但從60%到100%時(shí)每個(gè)梯度下都有沉淀，隨飽和度增大而增多，但最終得率只有50%不到。后來(lái)用異丙醇沉淀，加了9倍體積異丙醇之后得率100%，好得太多了。實(shí)在不行就換一種沉淀方法吧。 |
5樓2011-05-11 02:07:58
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7樓2011-05-13 18:53:57
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9樓2011-05-14 16:23:04
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11樓2018-11-26 19:21:44
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