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rabbit9355鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
融合蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)，怎么被我越做越復(fù)雜了？ 已有5人參與
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剛?cè)胧肿龇肿涌寺〉臇|西，導(dǎo)師給了個(gè)蛋白原核表達(dá)的實(shí)驗(yàn)，練練手。 主要就是找個(gè)蛋白的序列，連接到PET21中，在大腸桿菌表達(dá)體系中進(jìn)行表達(dá)，并且用His-tag進(jìn)行純化。全序列都是公司合成的，并且還幫我連到了pet21上。第一次老師帶著做的，第二次自己做的，純化后得到的結(jié)果也不錯(cuò)。可是后來(lái)自己又表達(dá)了幾次，都掛不上鎳住了。再后來(lái)，做著做著，蛋白竟然不表達(dá)了，感覺(jué)特別匪夷所思。不過(guò)每次都是可溶表達(dá)，我還是挺有安慰的。大家有沒(méi)有碰到類(lèi)似的情況啊，求建議。 是不是我的原理沒(méi)有搞清楚，但是感覺(jué)都是按照分子克隆上的操作進(jìn)行的，而且每次自己不確定的都會(huì)問(wèn)老師的。這個(gè)實(shí)驗(yàn)都做了半年了，越做越沮喪，蛋白的后續(xù)功能實(shí)驗(yàn)都還沒(méi)進(jìn)行呢。而且實(shí)驗(yàn)還是借別人的實(shí)驗(yàn)室做的，我都不好意思了。 哎，什么時(shí)候能看到希望呢，過(guò)來(lái)人給點(diǎn)鼓勵(lì)吧。 |
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chenxiang29
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9樓2013-10-06 09:12:18
2樓2011-05-11 11:37:27
rabbit9355
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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4樓2011-05-11 17:26:37
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