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[交流]
畢赤酵母轉(zhuǎn)化表達(dá) 已有7人參與
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周圍做畢赤酵母的人不是很多，所以積攢了挺多問題的，希望大家能幫幫忙。 1，畢赤酵母轉(zhuǎn)化后在MD板子上，長(zhǎng)幾天后竟然變色了，差不多算是紅色吧，是不是死掉了呢？ 2，同樣的條件，除了質(zhì)粒不相同外，上周轉(zhuǎn)化的效果很好，而這周就只有小小的菌苔，長(zhǎng)著長(zhǎng)著也都死掉了。糾結(jié)中。 3，關(guān)于畢赤酵母感受態(tài)的制作，1M DTT大家是用水還是緩沖液配制的？而兩種不同的配制方法，對(duì)于感受態(tài)的轉(zhuǎn)化效率是否有影響？ 現(xiàn)就這么多問題，希望大家能幫忙看看。 大家有什么問題也都可以提一下，要是能幫上的一定竭盡全力。 |
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兔兔yy070330
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲參與交流！ 2011-09-05 22:13:46
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wanhscn(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲參與交流！ 2011-09-05 22:13:46
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我做電轉(zhuǎn)后也出現(xiàn)過紅色的菌落，這個(gè)應(yīng)該是染菌沒錯(cuò)啦。至于感受態(tài)的制作，我是電轉(zhuǎn)的，用YPD搖菌至OD600=1.3-1.5，然后離心，用預(yù)冷的無菌水重懸菌體（2次），離心然后拿1M的預(yù)冷山梨醇洗一次，最后用1Ml山梨醇重懸，分裝后就可以用了。另外，有YNB何葡萄糖的培養(yǎng)基要用115度滅菌20Min,不用單獨(dú)配。 |
11樓2011-09-05 21:44:11
liby
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3樓2011-05-12 13:01:42
4樓2011-05-12 13:45:21
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