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沒有煙總有花新蟲 (初入文壇)
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[求助]
包涵體在PH10以上才能溶解 如何進(jìn)一步純化
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| 蛋白用PET28a載體表達(dá)，形成包涵體，但是在純化過程中,包涵體在PH12左右才能溶解，不能過鎳柱，求助如何進(jìn)行進(jìn)一步的純化？ |
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冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 - MolEPI: 46
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- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
2樓2011-05-16 00:20:39
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-05-16 08:55:19
dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-05-16 08:55:19
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必須引用回復(fù)才能加附件，版主別怪我，我不會(huì)直接加附件。 用陰離子交換柱層析不知道可不可以，如果你的蛋白質(zhì)等電點(diǎn)低于12，那就用pH12來溶解，層析時(shí)候起始緩沖液和洗脫液都用pH12，這樣你的蛋白質(zhì)就會(huì)被吸附，再隨著離子強(qiáng)度增大而被洗脫下來。也可以用疏水層析，只不過不能使用硫酸銨，因?yàn)闀?huì)生成氨水，可以用備用的鹽。 下面?zhèn)鲀蓚�(gè)層析柱的說明書。 |
3樓2011-05-16 00:26:53
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