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dlkatherine新蟲 (初入文壇)
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[求助]
怎么用PCR的方法構(gòu)建一種兼具人超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性的雙功能融合蛋白？
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用PCR的方法構(gòu)建一種兼具人超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)和過氧化氫酶(Catalase, CAT)活性的雙功能融合蛋白CAT-PTD-SOD，其中的PTD是序列為RKKRRQRRR的短肽 。然后把該基因轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌表達(dá)菌株CTS。要求討論實(shí)驗(yàn)步驟，可能的結(jié)果。PTD基因的編碼序列為5’-AGAAAGAAGAGAAGACAAAGAAGAAGA-3’。SOD，CAT的序列可以上NCBI查詢！ SOD: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/X02317? CAT: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AY028632? 提示：融合基因的擴(kuò)增是一個(gè)重疊PCR的反應(yīng)。引物的個(gè)數(shù)及設(shè)計(jì)很關(guān)鍵，要求寫詳細(xì)一點(diǎn)：每對(duì)引物及PCR反應(yīng)。 |
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