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雨林碟影銅蟲 (初入文壇)
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[交流]
PCR陰性老出 已有2人參與
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我做的PCR亞克隆 基因:2ul 上下游引物:0.5 ul qd plous :10ul h2o 陽(yáng)性:7ul 陰性:9ul 分別做了5支,加一支陰性管 電泳結(jié)果是陰性和陽(yáng)性條帶長(zhǎng)短,亮度都差不多,是什么原因啊 引物和水應(yīng)該不會(huì)污染,還有加樣很小心 怎么陰性還是出了 還要繼續(xù)膠回收嗎? |
木蟲 (著名寫手)

銅蟲 (初入文壇)
木蟲 (正式寫手)
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在回答樓主的問題之前,我需要指出1個(gè)問題: 分子生物學(xué)中,在體系中添加組分的時(shí)候,請(qǐng)不要用ul來衡量,需要轉(zhuǎn)換成摩爾數(shù),這樣才能真正的反映體系中的物質(zhì)的量。 你PCR獲得的片段,跟你預(yù)期獲得的片段大小一致嗎? 不要認(rèn)為水不會(huì)出問題,需要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)照來證明其沒有問題。 |
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