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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


[交流] 不同板的細(xì)胞密度轉(zhuǎn)換問題,藥物濃度問題

我實(shí)驗(yàn)用到6孔板96板和24孔板,之前考慮的是板的生長(zhǎng)面積,所以都是按面積比來轉(zhuǎn)換細(xì)胞密度。
但今晚突然想到一個(gè)問題,那我的藥不也應(yīng)該相應(yīng)的變?而不是固定終濃度??
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Chlo_Q(金幣+1): 不太理解,我做96孔板是100微細(xì)胞懸液,加1微藥物溶液(×100)。改24孔板,我可以是低密度加1毫升,或者高密度加0.5毫升,細(xì)胞數(shù)是一樣的,但體積不同,保持藥物濃度不變的話,同樣是那么多細(xì)胞,所受的藥量就不算設(shè)計(jì)的那樣啦 2011-05-26 02:54:31
Chlo_Q(金幣+3): 底面積和體積……其實(shí),好像96孔板面積是0.32平方厘米,工作體積是100-200微升,6孔板面積是9.5平方厘米,但工作體積是1-3毫升,不成比例的 2011-05-26 11:05:37
因?yàn)槟愕乃幍捏w積也在變,底面積(細(xì)胞密度)對(duì)應(yīng)的是你的溶液體積,你的6孔板加2ml,24孔板對(duì)應(yīng)的也就是0.5ml
2樓2011-05-25 08:13:45
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maoyz0127

金蟲 (正式寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+1): 細(xì)胞對(duì)藥物有沒有代謝作用呢? 2011-05-26 10:57:52
Chlo_Q(金幣+1): 2011-06-10 19:46:47
藥物濃度可以固定,不同板每孔加樣體積不一樣啊
3樓2011-05-25 08:21:35
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mafang68

金蟲 (著名寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+4): 謝謝,好像不管細(xì)胞數(shù)有多少,細(xì)胞所處的外環(huán)境都是同樣的藥物濃度,是這意思吧?我一直在想細(xì)胞會(huì)不會(huì)代謝消耗藥物呢…… 2011-05-26 10:54:54
藥物濃度當(dāng)然要固定啦,加樣體積不同,你的藥物量也是不同的
4樓2011-05-25 09:00:13
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mafang68

金蟲 (著名寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+5): 謝謝,基本明白了。細(xì)胞數(shù)根本生長(zhǎng)面積定,確保其活性;加藥量根據(jù)體積,確保其終濃度固定,對(duì)吧? 2011-05-26 16:51:46
不同板因?yàn)榭左w積不同,加的培養(yǎng)基體積不同,這就需要調(diào)整藥物量,保持終濃度相同。同時(shí)你的細(xì)胞量也需要相應(yīng)增加。至于你的細(xì)胞對(duì)藥物有沒有代謝就不好說啦,畢竟藥物代謝需要的微環(huán)境很重要,不是單個(gè)細(xì)胞環(huán)境就可以的。
5樓2011-05-26 11:16:34
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+3): 2011-05-26 17:20:12
0.32對(duì)100
9.5對(duì)3ml
有問題嗎
6樓2011-05-26 11:21:47
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-05-26 11:21:47:
0.32對(duì)100
9.5對(duì)3ml
有問題嗎

(°ο°)成比例了哦
一定得這樣嗎?我看著有些文獻(xiàn)很奇怪,對(duì)不上比例的
如果是這樣子,那24孔呢?
7樓2011-05-26 16:44:16
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mafang68

金蟲 (著名寫手)


Chlo_Q(金幣+1): 2011-06-03 09:18:23
恩,對(duì),呵呵
8樓2011-05-26 16:59:33
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蝸牛VS蝸牛

捐助貴賓 (著名寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+1): 血清對(duì)OD值的影響是很大,甚至藥物對(duì)OD值都有影響。但,你加DMSO前,難道都沒有離心吸上清嗎?呵呵 2011-05-26 17:24:16
OD值與培養(yǎng)液厚度關(guān)系是很大的
9樓2011-05-26 17:08:24
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2011-05-26 16:59:33:
恩,對(duì),呵呵

對(duì)不起,當(dāng)前用戶已經(jīng)獲得 9 個(gè)金幣了,不能給同一個(gè)用戶超過10個(gè)金幣。原來給不了你金幣了……
10樓2011-05-26 17:22:12
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maoyz0127

金蟲 (正式寫手)



小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+2): agreed,跟我想的一樣~ 2011-05-27 09:51:21
Chlo_Q(金幣+1): 2011-06-10 19:45:24
Chlo_Q(金幣+2): 2011-06-10 19:45:45
Chlo_Q(金幣+2): 2011-06-10 19:47:36
引用回帖:
Originally posted by maoyz0127 at 2011-05-25 08:21:35:
藥物濃度可以固定,不同板每孔加樣體積不一樣啊

正常藥物的代謝是在肝臟,需要肝微粒體P450酶系,單個(gè)細(xì)胞對(duì)藥物代謝作用應(yīng)該不大
11樓2011-05-27 07:49:46
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-05-26 11:21:47:
0.32對(duì)100
9.5對(duì)3ml
有問題嗎

有問題~
按這比例
96孔板是0.32對(duì)0.1
那24孔板難道是1.9對(duì)0.3125??
連工作體積都不到咧~
12樓2011-05-31 23:57:03
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+2): 版主~您的問題我說了,煩請(qǐng)進(jìn)一步跟我講一下24孔板的工作體積問題~ 2011-06-03 09:21:09
引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-05-31 23:57:03:
有問題~
按這比例
96孔板是0.32對(duì)0.1
那24孔板難道是1.9對(duì)0.3125??
連工作體積都不到咧~

一個(gè) 數(shù)學(xué)問題

你怎么得出的???
13樓2011-06-01 07:53:46
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-01 07:53:46:
一個(gè) 數(shù)學(xué)問題

你怎么得出的???

按您的比例啊
“0.32對(duì)100
9.5對(duì)3ml
有問題嗎”
面積放大30倍,體積跟著成30倍……
14樓2011-06-01 23:50:27
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
Chlo_Q(金幣+1): 我之前好像有點(diǎn)錯(cuò)誤,按比例應(yīng)該是0.6毫升而不是0.3毫升…… 2011-06-03 09:26:57
引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-06-01 23:50:27:
按您的比例啊
“0.32對(duì)100
9.5對(duì)3ml
有問題嗎”
面積放大30倍,體積跟著成30倍……

那你的1.9對(duì)應(yīng)的30倍是多少呢?
15樓2011-06-02 08:02:42
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-02 08:02:42:
那你的1.9對(duì)應(yīng)的30倍是多少呢?

1.9相對(duì)于0.32,最多只能算放大了6倍吧……
16樓2011-06-02 08:54:52
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-01 07:53:46:
一個(gè) 數(shù)學(xué)問題

你怎么得出的???

版主~~
我可以跟我解釋一下嗎?真的不解中。因?yàn)槲乙獪y(cè)的是上清液中的細(xì)胞因子,用的方法又是生物活性檢測(cè)法,體積一變,取的那20微升準(zhǔn)備測(cè)定的上清液里的濃度就會(huì)不同……而且我還想設(shè)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)每次取100微升多次測(cè)定,體積至少要有600微升以上吧~
17樓2011-06-03 09:16:06
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czcpudai

銅蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包,謝謝回帖
您好,我想問一下您做六孔板的實(shí)驗(yàn)時(shí)候,細(xì)胞開始的接種量是多少? 還有您給藥的時(shí)候,是在接種后多長(zhǎng)時(shí)間開始給藥的??謝謝!
18樓2012-11-26 13:17:06
已閱   回復(fù)此樓   關(guān)注TA 給TA發(fā)消息 送TA紅花 TA的回帖

czcpudai

銅蟲 (正式寫手)


還有一個(gè)問題,您用六孔板的時(shí)候一個(gè)孔里面要加多少毫升的培養(yǎng)液???
19樓2012-11-26 13:18:27
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