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alden127新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
關(guān)于Elisa實(shí)驗(yàn)中吸光度值衰減的問(wèn)題 已有3人參與
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最近在elisa實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)一個(gè)問(wèn)題：加完顯色液(購(gòu)買(mǎi))顯色一定時(shí)間后，再加終止液（2M H2SO4，自己配制）后，立即測(cè)試其吸光度值，等過(guò)幾分鐘再測(cè)試吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于第一次。 而且還有一個(gè)奇怪的現(xiàn)象：加終止液時(shí)，從第一條加到第12條后，測(cè)試發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減。前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品，并且包被相同蛋白。 有沒(méi)有其他蟲(chóng)友發(fā)現(xiàn)這問(wèn)題，請(qǐng)來(lái)討論和指點(diǎn)下。 |
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alden127
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silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-05-25 12:10:49
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silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-05-25 12:10:49
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1、可能你購(gòu)買(mǎi)的顯色液質(zhì)量不是很好，一般情況下，終止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯。 2、分析12條顯示逐級(jí)遞減的原因 a:顯色時(shí)間調(diào)整，如果你現(xiàn)在的顯色時(shí)間是10MIN，那調(diào)整到30MIN，再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。 b:終止液中加入少量甘油看下怎么樣。 祝試驗(yàn)順利。 |
4樓2011-05-25 11:03:16
alden127
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