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biofeixue木蟲 (著名寫手)
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[求助]
DEPC水是不是每次用前都要滅一菌?
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| DEPC水是不是每次用前都要滅一菌?多少滅菌能不能破壞DEPC? |
木蟲 (著名寫手)
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DEPC水不是滅菌。 開始帶你試驗(yàn)的人沒教全你嗎? DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強(qiáng)抑制劑。原位雜交在雜交及其以前的各步處理中,所有液體試劑都應(yīng)經(jīng)DEPC處理。方法是:取市售DEPc 1ml,加入1L待處理水(蒸餾水等)中,經(jīng)猛烈振搖后,于室溫靜止數(shù)小時(shí),然后高壓滅菌,以除去降解DEPC(DEPC分解為CO2和乙醇)。 注意:①DEPC是一種潛在的致癌物質(zhì),在操作中應(yīng)盡量在通風(fēng)的條件下進(jìn)行,并避免接觸皮膚。②含有Tris緩沖液的溶液中,不能加入DEPC DEPC處理水,是指用終濃度為0.1%DEPC處理過的的水,然后經(jīng)過高溫滅菌(121° 30min,一遍即可),同時(shí)也滅活了有毒性的DEPC,因?yàn)楹琓ris的溶液不能用含DEPC的水配制~需要滅活DEPC ( ⊙ o ⊙ )!用途是用來配制這些藥品試劑、溶解RNA的。 DEPC水,是指終濃度含0.1%DEPC的水,在1000ml雙蒸水中加入DEPC原液1ml,然后搖勻,靜置過夜~~,用途是用來處理器皿的 DEPC處理水最后要滅菌,不是為了滅菌,是為了滅活depc,高溫高壓降解DEPC成co2和乙醇。所以你的問題,滅一次就夠了。 ps:滅的時(shí)候你的滅菌鍋有沒有排氣?最好不要排氣,depc會(huì)排出一些來的。直接滅就行。 |
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