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biofeixue木蟲 (著名寫手)
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[求助]
請(qǐng)教RNA提取過程中的幾個(gè)問題？
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1、Trizol加入樣品后，和將其離心后取上清再加氯仿這兩步是不是要?jiǎng)×艺鹗幓靹�，其后各步都要輕柔一些？ 2. 用75%乙醇洗RNA沉淀時(shí)，要不用槍吹打液體，才能把樣品洗干凈。 3. 我見有人用0.3 ml 75%乙醇洗1.5 ml EP管中的RNA沉淀，洗三次，再離心三次，且加上乙醇后，就去離心，這樣能洗干凈RNA嗎？要不要把RNA吹打起來，會(huì)不會(huì)打段RNA。 4. 最后一步我見有人把20微升DEPC水加到EP管中，就分裝，問他是不是溶了，他講RNA見水就溶，吹打RNA會(huì)段。 以前是看到別人做的實(shí)驗(yàn)，總覺得會(huì)不會(huì)有問題，因自己想做，想事先請(qǐng)教一下各位大哥大姐，請(qǐng)大家多多指教。 |
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muzihai
銀蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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biofeixue(金幣+10): 請(qǐng)發(fā)引圖片到我的信箱吧？biofeixue@163.com 2011-05-30 09:09:32
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dhd997(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-05-30 12:40:03
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1.我最近也在提取RNA,我加氯仿還有以后的每一步都手動(dòng)劇烈振蕩混勻。 2.洗滌RNA的時(shí)候我一般加1ML75%乙醇，不吹打混勻，直接離心。一次即可。 3.最后加入DEPC水后，吹打混勻-80保存. 本想附一張電泳圖上去的，可是操作沒成功。不過給老師師兄看了都感覺還不錯(cuò)。 |
2樓2011-05-30 09:06:36
muzihai
銀蟲 (正式寫手)
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3樓2011-05-30 16:07:05
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