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甜酒慢品金蟲(chóng) (初入文壇)
小木蟲(chóng)
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[求助]
基因組提取
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| 我用了老板從國(guó)外帶回來(lái)的一種光合細(xì)菌提取基因組，菌名為chloroflexus，但是用CTAB法提的時(shí)候發(fā)現(xiàn)它出現(xiàn)一種黏黏的東西，以至于提不出基因組。由于資料顯示該菌是革蘭氏陰性的，所以我尚未用溶菌酶處理，大家有誰(shuí)有過(guò)相似經(jīng)歷，或者有好的解決辦法，幫我解決一下，好嗎？不甚感激！ |
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2樓2011-05-30 10:46:22
墨香若水
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小小囧蟲(chóng)
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3樓2011-05-30 12:02:50
甜酒慢品
金蟲(chóng) (初入文壇)
小木蟲(chóng)
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4樓2011-05-30 13:07:23
甜酒慢品(金幣+5): 2011-06-02 10:04:05
甜酒慢品(金幣+2): 2011-06-04 20:37:40
甜酒慢品(金幣+2): 2011-06-04 20:37:40
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5樓2011-05-30 23:51:32
hyy229
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6樓2011-06-01 11:47:08
xl_yang1987
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7樓2011-08-24 11:02:10
清水一杯
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1. 粘稠物質(zhì)為多糖；可以加溶菌酶，但對(duì)G-菌而言，效果并不明顯，CTAB就已經(jīng)夠了； 2. 發(fā)酵液離心后收集菌體，再用STE懸浮菌體，再離心收集； 3. 減少菌體的用量或加大裂解液的用量； 4. CTAB溫浴后最好冷卻至室溫或4度再抽提；酚/氯仿至少抽提2次，建議加入酚/氯仿后橫握離心管，以平放的8字形搖動(dòng)離心管，這樣既可充分使有機(jī)相/無(wú)機(jī)相混勻，又不至于使DNA斷裂成小片段，持續(xù)不短于5min； 5. 吸取水相時(shí)要注意不吸上沉淀，這個(gè)你懂的； 6. 最后沉淀時(shí)加入異丙醇，混勻后室溫靜置10min，吸/撈出絮狀沉淀，溶于TE或水，OD260/280應(yīng)該在1.9左右。 |
8樓2011-08-24 17:42:02
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