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沒有煙總有花新蟲 (初入文壇)
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[求助]
包涵體洗滌純化
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“包涵體的洗滌問題 通常的洗滌方法一般是洗不干凈的，我以前是這么做的，先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分，過濾除去未溶解的物質(zhì)，注意留樣跑電泳，然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳，如此類推可以一直稀釋到合適的濃度，你可以找到一個合適去除雜質(zhì)的辦法，其實這就是梯度沉淀的方法，我覺得比通常的直接洗脫效果好” 我用上述的方法 但是調(diào)到4M后12000RPM離心沒有看到沉淀析出。主要是洗滌后雜帶太多了想用上述方法試試去除雜帶，我想知道還有沒有其他i的方法在過NI柱前能盡可能多的去除雜蛋白，因為后期要做包涵體復(fù)性，所以想得到比較純的蛋白。謝謝  |
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