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鬼豆蟲木蟲 (正式寫手)
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[求助]
基因工程菌 誘導表達
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拿到一株基因工程菌，按照一般的細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)后卻沒有得到目標蛋白。是否是因為缺少誘導劑？  基因工程菌培養(yǎng)都需要誘導劑嗎？ |
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ganchao1776
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rainwander(金幣+2): 鼓勵交流 2011-06-12 22:09:34
鬼豆蟲(金幣+2): 2011-07-06 08:49:20
rainwander(金幣+2): 鼓勵交流 2011-06-12 22:09:34
鬼豆蟲(金幣+2): 2011-07-06 08:49:20
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按質(zhì)粒存在形式可分兩類，一、質(zhì)粒以整合到基因組的形式存在，這種情況不需要考濾培養(yǎng)過程中質(zhì)粒丟失的問題；二、質(zhì)粒以游離形式存在，這種情況要考濾培養(yǎng)過程中質(zhì)粒的丟失問題（也即傳代過程中質(zhì)粒拷貝數(shù)減少），一般轉(zhuǎn)化后的平板4度放置一個月是沒有太大的問題的（前提是平板所用的培養(yǎng)基不能有誘導成份存在）； 按轉(zhuǎn)錄的啟動方式也可分兩類，一、組成形表達，即在菌體擴增時蛋白已經(jīng)開始表達，不需要添加誘導劑，這種類型有一個缺點是無法高密度培養(yǎng)，即一般單位體積收獲目標蛋白的量不多；二、誘導型表達，這種形式只有在加了某種誘導劑后蛋白才開始表達，可以高密度培養(yǎng)，單位體積收獲目標蛋白的量多。 |
8樓2011-06-11 23:01:02
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2樓2011-06-09 15:43:59
劉懷
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金幣+5): 謝謝交流哈~ 2011-06-09 21:30:39
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:47:54
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:50:37
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:51:16
scelab(金幣+5): 謝謝交流哈~ 2011-06-09 21:30:39
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:47:54
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:50:37
鬼豆蟲(金幣+1): 2011-07-06 08:51:16
| 基因工程菌的培養(yǎng)不一定需要加入誘導劑，有時工程菌在生長過程中會產(chǎn)生所需的誘導劑。你所說的工程菌未得到所需要的蛋白質(zhì)，并不是它未表達所需的蛋白質(zhì)，可能是在細菌培養(yǎng)過程中所生產(chǎn)出的蛋白質(zhì)以細菌所需的原料被細菌所消耗。另外，細菌在培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生一些抑制目標蛋白質(zhì)表達的激素，使目標蛋白不能表達，得不到所需蛋白質(zhì)。 |
3樓2011-06-09 19:39:05
lly198784
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4樓2011-06-10 11:49:01
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