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sn198651銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
SOB培養(yǎng)基與LB培養(yǎng)基做大腸桿菌感受態(tài)哪個(gè)更好 已有7人參與
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 網(wǎng)上找不到SOB培養(yǎng)基的原理及配方誰(shuí)知道  |
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 【分子生物】EPI帖 |
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beautybanana
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
amisking(金幣+2, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-10 20:20:27
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
amisking(金幣+2, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-10 20:20:27
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給你標(biāo)準(zhǔn)的如下：（來(lái)源于TAKARA） （SOB培養(yǎng)基） 組分濃度：2%（W/V) Tryptone 0.5%(W/V) Yeast Extract 0.05%(W/V) NaCl 2.5mM KCl 10mM MgCl2 配制量 1L 配制方法： 1.配制250mM KCl溶液:在90ml的去離子水中溶解1.86gKCl后，定容 至100ml 2.配制2M MgCl2溶液：在 90ml的去離子水中溶解19gMgCl2，定容 至100ml ，高溫高壓滅菌 3.稱取下列試劑置于1L燒杯中： Tryptone 20g Yeast Extract 5g NaCl 0.5g 4.加入約800ml的去離子水，充分溶解攪拌 5.量取10ml 250mM KCl溶液，加入到燒杯中 6.滴加5N NaCl溶液（約0.2ml).調(diào)節(jié)pH至7.0 7.加入去離子水將培養(yǎng)基定容至1L 8.高溫高壓滅菌后，4℃保存 9.使用前加入5ml的2M MgCl2溶液 |
4樓2011-06-10 16:18:21
天使托
專家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
T.Shen
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1949stone(金幣+2): 鼓勵(lì) 2011-06-10 15:15:04
dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
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dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
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是你沒(méi)有找還是網(wǎng)上真的沒(méi)有SOB的配方呢？ Google 中輸入：SOB medium 很多的。。。 其實(shí)一般情況下我們用SOC培養(yǎng)基來(lái)做大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞。SOC培養(yǎng)基比SOB多加了葡糖糖（100ml里添加2ml1M的Glucose）；當(dāng)然了好一點(diǎn)的LB也可以，所謂好一點(diǎn)的LB就是蛋白胨是國(guó)外進(jìn)口的純度好一點(diǎn)，純度高的蛋白胨是稍微泛點(diǎn)綠色的。。。 其實(shí)個(gè)人認(rèn)為感受態(tài)細(xì)胞的效率高低跟很多因素有關(guān)系，培養(yǎng)基是一種，培養(yǎng)基只是保證菌體生長(zhǎng)的好不好；而具體的操作過(guò)程中，要清洗菌體，還要低溫操作，等等均會(huì)影響感受態(tài)細(xì)胞的效率的。。。 [ Last edited by 天使托 on 2011-6-10 at 16:21 ] |
2樓2011-06-10 15:04:10
Arrennew
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5樓2011-06-10 20:32:45
gwbk
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6樓2011-06-11 19:20:10
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