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[求助]
這膠是怎么了？小女子求解
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| 各位大蝦，我染出來的膠為什么上部顏色淺，下部顏色深呢（背景色），奇怪很，求解？變性聚丙烯酰胺凝膠，染色是銀染法（強(qiáng)堿） |
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天使托
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
-
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2樓2011-06-14 13:11:48
3樓2011-06-14 16:47:39
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-21 08:50:52
墨池(金幣+1): 2011-06-22 15:50:17
西瓜(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-21 08:50:52
墨池(金幣+1): 2011-06-22 15:50:17
| 你這膠看起來有點(diǎn)奇怪啊，呵呵。初步看來應(yīng)該不是膠的問題，因?yàn)镸aker上下都是均勻的，下面也只是點(diǎn)樣孔里顏色比較深，應(yīng)該是樣品的問題（比如小分子量的蛋白比較多）。建議脫色和染色找到上下的平衡點(diǎn)以達(dá)到最佳的觀察效果。不知道對(duì)不對(duì)，我只是對(duì)照?qǐng)D這樣分析，希望對(duì)您有幫助 |
4樓2011-06-21 08:11:01
5樓2011-06-21 08:14:10
6樓2011-06-22 15:51:13
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, EPI+1): 很好的建議 2011-06-22 16:57:32
墨池(金幣+3): 2011-06-23 09:36:47
西瓜(金幣+5, EPI+1): 很好的建議 2011-06-22 16:57:32
墨池(金幣+3): 2011-06-23 09:36:47
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從銀染的結(jié)果圖，我給你幾點(diǎn)建議： 1.PCR在體系還要進(jìn)一步優(yōu)化，特別是模板濃度。 2.所選的marke和你擴(kuò)增片段范圍不是很吻合，建議選用弄夠覆蓋整個(gè)目的片段區(qū)域的marker。 3.銀染的效果不理想，主要從試驗(yàn)的固定、染色、脫色及所用試劑著手。當(dāng)中最重要的就是時(shí)間、及顯影色的溫度。銀染已有經(jīng)典的試驗(yàn)流程，嚴(yán)格按照流程做就不會(huì)出現(xiàn)這些問題，同時(shí)依據(jù)自己試驗(yàn)，摸索也很重要。 希望能對(duì)你有所幫助！ |
7樓2011-06-22 16:39:50
8樓2011-06-22 17:05:57
毛妞
鐵蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 女性生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能與
9樓2011-06-23 19:21:23
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