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wb529656446鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
測細(xì)胞NO用什么試劑啊
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| 測細(xì)胞NO,不用試劑盒,能用什么試劑? |
木蟲 (正式寫手)
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由于NO不穩(wěn)定,在體內(nèi)會形成NO2-,NO3-,和超氧硝基離子等,檢測的方法也具有很多種,比較粗糙的方法就是用一些試劑捕獲,或者檢測一些與NO相關(guān)的指標(biāo)成分的方法,如LZ所說,常用的檢測NO試劑有: 1、Griess試劑,由1%對氨基苯磺酰胺,0.1%N-(1-奈基)-乙二胺,5%H3PO4組成,通過還原NO3-為NO2-,然后NO2-與Griess試劑反應(yīng)測得NO3-/NO2-,間接檢測NO含量,所以此種方法專屬性不強(qiáng); 2、硝酸i還原酶,由此酶特異性還原NO3-為NO2-,然后如1方法,測得的還是間接的NO含量; 3、間接測量NO的含量,可以檢測瓜氨酸、NOS、CGMP的含量,試劑自己查找。 想要直接測得NO的含量,通用的有1、電化學(xué)還原的方法,將一系列含有N、O的基團(tuán)還原為NO,然后根據(jù)電極膜電位的不同定量;2、利用捕獲試劑N-甲基-D-葡糖胺二硫代甲酸鐵[(MGD)2-Fe2+]等特異性捕獲NO,用ESR方法檢測NO。 LZ,如果單純用一些試劑檢測NO,很多情況會出現(xiàn)假陽性結(jié)果!如果有條件,建議用ESR和測量NOS的方法檢測NO。 |
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