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liuliancy鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
葡聚糖凝膠層析,流速過慢
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| 大家都是怎么做葡聚糖凝膠層析的??我選用的G-100的葡聚糖凝膠,用蒸餾水煮沸2h溶脹后,裝柱,自然沉降,結(jié)果流速很慢,大概5--6秒一滴,這個(gè)正常嗎?凝膠是脫過氣的,是不是我哪里操作有誤?請(qǐng)高手指教。。! |
【分子生物】EPI帖 |
鐵蟲 (初入文壇)
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
![]() |
專家經(jīng)驗(yàn): +248 |
| 內(nèi)徑和體積多大?一分鐘多少流速?出水管大小不同,一滴的體積也不同,要測(cè)過不加壓力的情況下,就是自然流過柱,要多久才能有1毫升,或者規(guī)范的說是一分鐘多少毫升。我的內(nèi)徑1.6厘米,體積30毫升的自裝柱,流速為0.8-1毫升每分鐘。GE的預(yù)裝柱一般推薦流速也差不多是1毫升每分鐘,不會(huì)超過3的。除非是脫鹽柱,50毫升的體積的,可以達(dá)到15毫升每分鐘。 |

鐵桿木蟲 (正式寫手)
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |
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稍微慢了點(diǎn),凝膠柱填料也不是很剛性的,如果太重底部的凝膠會(huì)有點(diǎn)變形,流速就會(huì)慢一些。半徑一厘米,那高就是不到40厘米,我懷疑高了一些。但是也可以做一次,因?yàn)橐话阋粋(gè)半柱床體積之后就什么東西都出來了,照0.5毫升每分鐘來算也只要一個(gè)半小時(shí)而已。高一些,分離得可能好一些。如果矮一些,分離效果可能會(huì)差一些,流速快一些也沒有什么意義。先別有心理負(fù)擔(dān),做一次看效果如何。 我還覺得似乎兩個(gè)小時(shí)用來溶脹稍微短了些,不過也無所謂了。 |

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