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zyx335588捐助貴賓 (正式寫手)
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菌搖不起來為什么啊
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| 最近我用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株BL21（DE3）和Rosetta（DE3），長出的單菌落搖16個(gè)小時(shí)左右，取200微升接到3mL LB培養(yǎng)基中搖四五個(gè)小時(shí)后看不出有變化，請問各位高人，這是為什么啊。按說200微升菌體量已經(jīng)很大了，而且培養(yǎng)基用的也是與搖單菌落時(shí)相同的培養(yǎng)基。 |
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2樓2011-06-21 16:12:46
zsy1106
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3樓2011-06-21 17:00:57
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4樓2011-06-21 21:14:07
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5樓2011-06-24 19:35:04
【答案】應(yīng)助回帖
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lstt09nk(金幣+3, EPI+1): 感謝交流 2011-07-17 20:18:42
zyx335588(金幣+5): 謝謝 2011-07-31 00:43:08
lstt09nk(金幣+3, EPI+1): 感謝交流 2011-07-17 20:18:42
zyx335588(金幣+5): 謝謝 2011-07-31 00:43:08
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首先要做的時(shí)： 1、槍頭、菌管高溫濕法滅菌（保證潔凈度） 2、操作的時(shí)候，嚴(yán)格按無菌操作流程做（杜絕外來污染源） 3、可是嘗試增大到6-7ml；同時(shí)培養(yǎng)時(shí)間適當(dāng)延長，如過夜等 4、檢測培養(yǎng)的條件：溫度、轉(zhuǎn)速 5、結(jié)果如果還是如上的話可能原因： a、你的菌株本來就是假陽性， b、擴(kuò)繁菌株系老化，更換菌株 c、如果不是菌株的問題，重新電擊或熱擊。 |
6樓2011-07-16 21:53:13
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