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[求助]
化學(xué)發(fā)光問題求助
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| 在儀器檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)時(shí)，儀器老是提示信號(hào)檢測(cè)超出所能檢測(cè)的線性范圍，但是實(shí)際信號(hào)在儀器測(cè)試范圍內(nèi)，想問下是不是載體的純?cè)趯?duì)化學(xué)發(fā)光及信號(hào)的檢測(cè)產(chǎn)生了影響，如果是的話，是怎么個(gè)情況？最好說具體點(diǎn)，不勝感激 |
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2樓2011-06-21 16:19:42
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
劉延平(金幣+20): 謝謝 2011-06-22 08:44:03
lstt09nk(金幣+7): 感謝新蟲參與 2011-06-22 17:11:44
劉延平(金幣+20): 謝謝 2011-06-22 08:44:03
lstt09nk(金幣+7): 感謝新蟲參與 2011-06-22 17:11:44
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1、有的載體出現(xiàn)，有的不出現(xiàn)，個(gè)人覺得有可能是載體帶來的問題。因?yàn)槿绻駱侵魉f，讀值會(huì)超出儀器檢測(cè)范圍的話，說明讀值是很高的，在這么強(qiáng)的催化條件下，底物中的魯米諾和氧化劑會(huì)被較快的消耗掉（通常我遇到這種情況時(shí)，讀值已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出檢測(cè)的線性范圍了），然后讀值會(huì)迅速的降低。而板式化學(xué)發(fā)光的讀值是1孔1孔讀的，先讀的孔，底物還沒被消耗過多，就出現(xiàn)樓主說的狀況，而后讀的孔因?yàn)楸容^晚讀，底物已消耗過多哦，讀值已經(jīng)下降，就不會(huì)出現(xiàn)超出的狀況了。樓主可看一下數(shù)據(jù)，是否存在此規(guī)律？ 2、如果出現(xiàn)這種情況，也未必是載體直接造成的，個(gè)人覺得可能因?yàn)檩d體的存在，導(dǎo)致板沒有洗干凈，游離HRP殘留的可能性較大； 3、如果以上情況不符，樓主可以試試黑色的板，黑板因?yàn)椴幌癜装宸垂�，讀值通常要低10倍，但因?yàn)楸镜滓矔?huì)低10倍，所以并不太會(huì)影響分析靈敏度。 最后祝樓主好運(yùn)！ |
6樓2011-06-21 20:38:24
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7樓2011-06-21 23:09:50
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謝謝你的詳細(xì)分析，我還有問題不明白：我用的發(fā)光液是經(jīng)過驗(yàn)證在5min之內(nèi)是很穩(wěn)定，甚至30min之內(nèi)信號(hào)變化也不很大，對(duì)于隨著時(shí)間信號(hào)的減弱可能不成立。如果純粹用HRP和發(fā)光液進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，信號(hào)即使很高也儀器也不會(huì)出現(xiàn)提示；而將HRP接到載體上后，儀器有時(shí)會(huì)出現(xiàn)對(duì)話框提示信號(hào)檢測(cè)超出所能檢測(cè)的線性范圍，實(shí)際信號(hào)沒那么高（這點(diǎn)可以通過其它方法確定）。 如果您在這方面有所了解，還請(qǐng)給些見解，謝謝！ |
8樓2011-06-22 09:01:42
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