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化學(xué)蟲(chóng)前來(lái)請(qǐng)教：protein A/G,二抗
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做實(shí)驗(yàn)要用到啥融合蛋白，還有二抗。文獻(xiàn)上寫(xiě)的是recombinant fusion Protein A/G (1:1 in moles) ，我看一些生物公司產(chǎn)品目錄里都是protein a，這個(gè)是分別買(mǎi)來(lái)protein a和g，然后自己混合，還是這就是一種叫protein A/G的物質(zhì)呢？ 還有，一抗是可替寧抗體，二抗應(yīng)該買(mǎi)什么，必須是文獻(xiàn)中用的F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG嗎？ 還有這些生物藥品使用和保存中有什么特殊要求和需要注意的地方？要不要純化走柱子啥的？ 我是外行，提的問(wèn)題可能有些低級(jí)，還望各位蟲(chóng)友不吝賜教！ |
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喵汪(金幣+1):謝謝參與
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-24 20:08:34
喵汪(金幣+1):謝謝參與
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-24 20:08:34
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蛋白A和蛋白G是兩種不同的蛋白，是兩種不同的分子。 recombinant fusion Protein A/G (1:1 in moles)這種說(shuō)法我沒(méi)有見(jiàn)過(guò)，字面意思像是把兩個(gè)蛋白融合到一起表達(dá)，不是簡(jiǎn)單的混合，而是成為一種分子。 一抗是可替寧抗體，二抗是什么，這個(gè)關(guān)鍵不在可替寧上，而是可替寧的這個(gè)一抗是用什么制備的？如果是鼠源，二抗就用goat anti-mouse ，這邊的關(guān)鍵就是鼠，不僅可以是羊抗鼠，也可以是兔抗鼠，等等。一抗一般在樓主提的這種情況下指的是 IgG，那么就用goat anti-mouse IgG就可以了，不一定非要是F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG，后者只是前者的片段。但1抗還有可能是IgM，這時(shí)，你的二抗就要換了，例如goat anti-mouse IgM。最后，上面提到的Protein A和G ，這兩種蛋白可以和多數(shù)的哺乳動(dòng)物的IgG結(jié)合，如果樓主的一抗是鼠源可替寧抗體，那么這兩種蛋白均可作為二抗來(lái)用。 講了一大篇，希望不要把樓主弄糊涂了才好。  |
2樓2011-06-24 18:46:01
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7樓2011-06-25 11:02:47
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