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wangdandelia木蟲 (正式寫手)
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[交流]
兩步PCR 已有2人參與
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最近發(fā)現(xiàn)兩步PCR可以提高引物的特異性，之前用正常的PCR總是會(huì)出現(xiàn)非特異性，提高退火溫度也不管用，所以，如果在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)想提高引物特異性的蟲友們，不妨試一試兩步PCR擴(kuò)增法（退火和延伸一起進(jìn)行），但是前提是擴(kuò)增的片段要短一點(diǎn)，我的目的片段是500bp。 現(xiàn)在把我的擴(kuò)增程序?qū)懴聛�，僅供參考，希望可以幫助大家： 98℃，2min; 97℃ 15S，69℃ 1min，25個(gè)循環(huán)； 72℃，10min。 只是我不清楚為什么兩步PCR可以提高特異性，如果哪位蟲友知道，可以和大家分享一下，謝謝咯~ [ Last edited by wangdandelia on 2011-6-29 at 09:48 ] |
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2樓2011-06-29 10:28:44
lahsxl
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2011-07-01 22:41:16
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