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柚柚海風(fēng)

金蟲 (正式寫手)

[交流] 第一次鑒定霉菌 請(qǐng)高手指點(diǎn) 已有8人參與

第一次做霉菌鑒定,實(shí)驗(yàn)室沒有沒有電鏡,照片一般都是40倍拍的,不過我上傳的時(shí)候放大了一點(diǎn)。孢子是100倍,一頭霧水,還望高手指點(diǎn)啊




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newtime007

木蟲 (正式寫手)

成長的微生物

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
amisking(金幣+5): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-07-01 20:16:39
形態(tài)鑒定步驟:
 1.菌落的觀察:為了培養(yǎng)完整的巨大菌落以供觀察記錄,可將純培養(yǎng)物點(diǎn)植于平板上。方法是:將平板倒轉(zhuǎn),向上接種一點(diǎn)或三點(diǎn),每菌接種兩個(gè)平板,倒置于25~28℃溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)剛長出小菌落時(shí),取出一個(gè)平皿,以無菌操作,用小刀將菌落連同培養(yǎng)基切下1cm×2cm的小塊,置菌落一側(cè),繼續(xù)培養(yǎng),于5~14d進(jìn)行觀察。此法代替小培養(yǎng)法,可直接觀察子實(shí)體著生狀態(tài)。
  2 斜面觀察:將霉菌純培養(yǎng)物劃線接種(曲霉、青霉)或點(diǎn)種(鏈刀菌或其他菌)于斜面,培養(yǎng)5~14d,觀察菌落形態(tài),同時(shí)還可以將菌種管置顯微鏡下用低倍鏡直接觀察孢子的形態(tài)和排列。
  3 制片:取載玻片加乳酸-苯酚液一滴,用接種針鉤取一小塊霉菌培養(yǎng)物,置乳酸-苯酚液中,用兩支分離針將培養(yǎng)物撕開成小塊,切忌涂抹,以免破壞霉菌結(jié)構(gòu)。然后加蓋玻片,如有氣泡,可在酒精燈上加熱排除。制片時(shí)最好是在接種罩內(nèi)操作,以防孢子飛揚(yáng)。
  4 鏡檢:觀察霉菌的菌絲和孢子的形態(tài)和特征、孢子的排列等,并做詳細(xì)記錄。
  5 報(bào)告:根據(jù)菌落形態(tài)及鏡檢結(jié)果,參照各種霉菌的形態(tài)描述及檢索表,確定菌種名稱。
常見霉菌的形態(tài)特征
  1 曲霉屬(Aspergillus)
  本屬的產(chǎn)毒霉菌主要包括黃曲霉、寄生曲霉、雜色曲霉、構(gòu)巢曲霉和棕曲霉。這些霉菌的代謝產(chǎn)物為黃曲霉毒素、雜色曲霉素和棕曲霉毒素。
  曲霉屬的顏色多樣,而且比較穩(wěn)定。營養(yǎng)菌絲體由具橫隔的分枝菌絲構(gòu)成,無色或有明亮的顏色,一部分埋伏型,一部分氣生型。分生孢子梗大都無橫隔,光滑、粗糙或有麻點(diǎn)。梗的頂端膨大形成棍棒形、橢圓形、半球形或球形的頂囊,在頂囊上生出一層或二層小梗,雙層時(shí)下面一層為;,每個(gè)梗基上再著生兩個(gè)或幾個(gè)小梗。從每個(gè)小梗的頂端相繼生出一串分生孢子。由頂囊、小梗以及分生孢子鏈構(gòu)成一個(gè)頭狀體的結(jié)構(gòu),稱為分生孢子頭。分生孢子頭有各種不同顏色和形狀,如球形、放射形、棍棒形或直柱形等。曲霉屬只少數(shù)種形成有性階段,產(chǎn)生封閉式的閉囊殼。某些種產(chǎn)生菌核或菌核結(jié)構(gòu)。少數(shù)種可產(chǎn)生不同形狀的殼細(xì)胞。
  2 黃曲霉(A.flavuss)
  屬于黃曲霉群。在察氏瓊脂培養(yǎng)基上菌落生長較快,10~14d直徑3~4或4~7cm,最初帶黃色,然后變?yōu)辄S綠色,老后顏色變暗,平坦或有放射狀溝紋,反面無色或帶褐色。在低倍顯微鏡下觀察可見分生孢子頭疏松放射狀,繼變?yōu)槭杷芍鶢睢7稚咦庸6鄰幕|(zhì)生出,長度一般小于1mm。有些菌絲產(chǎn)生帶褐色的菌核。制片鏡檢觀察可見分生孢子梗極粗糙,直徑10~20μm。頂囊燒瓶形或近球形,直徑10~65μm,一般多為25~45μm。全部頂囊著生小梗,小梗單層、雙層或單、雙層同時(shí)生在一個(gè)頂囊上;梗基6~10μm×4~5.5μm,小梗6.5~10μm×3~5μm。分生孢子球形、近球形或稍作洋梨形,3~6μm,粗糙。
  3 寄生曲霉(A.parasiticus)
  亦屬于黃曲霉群,8~10d菌落2.5~4cm,平坦或帶放射狀溝紋,幼時(shí)帶黃色,老后呈暗綠色,反面,奶油色至淡褐色。低倍顯微鏡下觀察見分生孢子頭疏松放射狀,直徑400~500μm,分生孢子梗長短不一,一般為200~1000μm,制片鏡檢觀察,見分生孢子梗光滑或粗糙,近頂囊處寬10~12μm,頂囊近球形或燒瓶形或杵狀,直徑20~35μm,小梗單層,7~9μm×3~4μm,排列緊密。分生孢子球形,極粗糙,具小刺,直徑3.5~5.5μm,未報(bào)道過產(chǎn)生菌核。
  4 雜色曲霉(A.versicolor)
  屬于雜色曲霉群。在察氏瓊脂培養(yǎng)基上菌落生長局限,14d直徑2~3cm,絨狀、絮狀或兩者同時(shí)存在。顏色變化相當(dāng)廣泛,不同菌系可能局部淡綠、灰綠、淺黃甚至粉紅色;反面近于無色至黃橙色或玫瑰色。有的菌落有無色至紫紅色的液滴。分生孢子頭疏松放射狀,大小為100~125μm。分生孢子梗長度可達(dá)500~700μm,寬12~16μm,光滑,無色或略帶黃色。頂囊半橢圓形至半球形,上半部或四分之三部位上著生小梗。小梗雙層,梗基5.5~8μm×3μm,小梗5~7.5μm×2~2.5μm,分生孢子球形,粗糙,直徑2.5~3μm或稍大。有些菌系產(chǎn)生球形的殼細(xì)胞。
     5 構(gòu)巢曲霉(A.nidulans)
  屬于構(gòu)巢曲霉群。菌落生長較快,14d直徑5~6cm,絨狀,綠色,有的菌系由于產(chǎn)生較多的閉囊殼而顯現(xiàn)黃褐色,反面紫紅色。分生孢子頭短柱形,40~80μm×25~40μm。分生孢子梗極短,常彎曲,一般75~100μm,近頂囊處直徑3.5~5μm,褐色,壁光滑。頂囊半球形,直徑8~10μm。小梗雙層,梗基5~6μm×2~3μm,小梗5~6μm×2~2.5μm。分生孢子球形,粗糙,直徑3~3.5μm。閉囊殼球形,暗紫紅色,直徑135~150μm。子囊孢子雙凸鏡形,紫紅色,約5μm×4μm,有兩個(gè)雞冠狀突起。閉囊殼外面包圍著一層殼細(xì)胞,淡黃色,球形,壁厚,直徑約25μm! 
  6 赭曲霉(A.ochraceus)
  屬于赭曲霉群。在察氏瓊脂培養(yǎng)基上菌落生長稍局限,10~14d直徑3~4cm,褐色或淺黃色,基質(zhì)中菌絲無色或具有不同程度的黃色或紫色,反面帶黃褐色或綠褐色。分生孢子頭幼時(shí)球形,老后分裂成2~3個(gè)柱狀分叉。分生孢子梗長達(dá)1~1.5mm,直徑10~14μm,帶黃色,極粗糙,有明顯的麻點(diǎn)。頂囊球形,直徑30~50μm或更大。小梗雙層,自頂囊全部表面密集著生。分生孢子球形至近球形,直徑2.5~3μm或更大,常略粗糙。有些菌系產(chǎn)生較多的菌核,初期為白色,老后淡紫色,球形、卵形至柱形,直徑達(dá)1mm。
 7 青霉屬(Penicillium)
  本屬產(chǎn)毒霉菌,主要包括黃綠青霉、桔青霉、圓弧青霉、展開青霉、純綠青霉、紅青霉、產(chǎn)紫青霉、冰島青霉和皺褶青霉等。這些霉菌的代謝產(chǎn)物為黃綠青霉素、枯青霉素、圓弧偶氮酸、展青霉素、紅青霉素、黃天精、環(huán)氯素和皺褶青霉素。
  青霉屬的營養(yǎng)菌絲體呈無色、淡色或鮮明的顏色,具橫隔,或?yàn)槁穹突虿糠致穹筒糠謿馍。氣生菌絲密氈狀、松絮狀或部分結(jié)成菌絲索。分生孢子梗由埋伏型或氣生型菌絲生出,稍垂直于該菌絲(除個(gè)別種外,不象曲霉那樣生有足細(xì)胞),單獨(dú)直立或作某種程度的集合乃至密集為一定的菌絲束,具橫隔,光滑或粗糙。其先端生有掃帚狀的分枝輪,稱為帚狀枝。帚狀枝是由單輪或兩次到多次分枝系統(tǒng)構(gòu)成,對(duì)稱或不對(duì)稱,最后一級(jí)分枝即產(chǎn)生孢子的細(xì)胞,稱為小梗。著生小梗的細(xì)胞叫;,支持梗基的細(xì)胞稱為副枝。小梗用斷離法產(chǎn)生分生孢子,形成不分枝的鏈,分生孢子呈球形、橢圓形或短柱形,光滑或粗糙,大部分生長時(shí)呈藍(lán)綠色,有時(shí)呈無色或呈別種淡色,但決不呈污黑色。少數(shù)種產(chǎn)生閉囊殼,或結(jié)構(gòu)疏松柔軟,較快地形成子囊和子囊孢子,或質(zhì)地堅(jiān)硬如菌核狀由中央向外緩慢地成熟。還有少數(shù)菌種產(chǎn)生菌核。
   8 桔青霉(P.citrinum)
  屬于不對(duì)稱青霉組,絨狀青霉亞組,桔青霉系。菌落生長局限,10~14d直徑2~2.5cm,有放射狀溝紋,大多數(shù)菌系為絨狀,另一些則呈現(xiàn)絮狀,艾綠色。反面黃色至橙色,培養(yǎng)基顏色相仿或帶粉紅色。滲出液呈淡黃色。低倍顯微鏡下分生孢子鏈為明確的分散柱狀。分生孢子梗大多自基質(zhì)生出,也有自菌落中央氣生菌絲生出者,一般50~200μm×2.2~3μm,壁光滑,一般不分枝。帚狀枝由3~4個(gè)輪生而略散開的;鶚(gòu)成,12~20μm×2.2~3μm,每個(gè);洗厣6~10個(gè)略密集而平行的小梗,8~11μm×2~2.8μm。分生孢子呈球形或近球形,直徑2.2~3.2μm,光滑或近于光滑! 
上善若水,水善利萬物而不爭
2樓2011-07-01 11:14:11
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普通回帖

柚柚海風(fēng)

金蟲 (正式寫手)

謝謝!學(xué)習(xí)了!
3樓2011-07-01 11:19:58
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microxy

鐵桿木蟲 (著名寫手)

★ ★
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rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)交流 2011-07-03 16:54:41
真菌的鑒定關(guān)鍵分兩步:1顯微形態(tài)鑒定,尤其是繁殖菌絲,可以初步判斷類屬;2 ITS或18sRNA擴(kuò)增和比對(duì)及系統(tǒng)分析。
4樓2011-07-01 11:57:15
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柚柚海風(fēng)

金蟲 (正式寫手)

后一步驟是不可能的  前一步驟多多努力吧
5樓2011-07-01 13:24:56
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冼亮淀粉酶

專家顧問 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
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amisking(金幣+2, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-07-01 20:16:47
第一張只能看得出菌絲有隔,第二張只能看出孢子是圓的,不單只曲霉和青霉,就連枝孢霉根霉木霉都是這樣的,樓主應(yīng)該發(fā)孢子梗的照片。至于二樓newtime007
所粘貼上來的東西,只說了曲霉和青霉,而且那些大小尺寸的必須要掃描電鏡才能測量,我覺得樓主還是找魏景超《真菌鑒定手冊(cè)》來給自己普及一下知識(shí)更恰當(dāng),雖然是1979年的,但普及知識(shí)也不用找新的,論壇上有人上傳過了
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=1000847
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=3305850
要是還有更強(qiáng)的求知欲,看一下中科院編的《中國真菌志》,一共有三十多卷,很完備。
流星來時(shí)我許了個(gè)愿,愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復(fù)發(fā)帖和僅把論壇當(dāng)解決問題工具,久不看論壇一來就提問者,寧棄EPI和VIP也不回帖。
6樓2011-07-01 15:35:05
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aloon111

金蟲 (正式寫手)


小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包,謝謝回帖
看真菌鑒定手冊(cè),不會(huì)錯(cuò) 。
匯天下之賢
7樓2011-07-03 09:57:08
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kejing0904

新蟲 (初入文壇)


小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包,謝謝回帖
樓主,我現(xiàn)在正在鑒定霉菌,每次鑒定周圍都會(huì)有很多掉落下來的孢子?應(yīng)該怎么樣減少孢子呢?孢子太多影響片子的效果?還有你說的菌落的觀察,不是很看懂,切完一小塊后,是觀察那個(gè)培養(yǎng)皿的菌落形態(tài)呢?置菌落一側(cè)又什么意思呢?求解。
天道酬勤
8樓2013-09-02 16:19:26
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plumplumgxc

金蟲 (正式寫手)


小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包,謝謝回帖
只看菌絲和孢子大多是看不出什么的。要看孢子器或者孢子梗的形態(tài),再結(jié)合孢子形態(tài)初步判斷。圖片不合格
科研這條道不好走啊。。。
9樓2013-11-08 17:05:52
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1921952610

鐵蟲 (正式寫手)

謝謝了。好動(dòng)西。

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]
10樓2013-11-12 14:33:47
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