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[求助]
質(zhì)粒圖譜閱讀
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最近剛接觸真核質(zhì)粒,發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)好復(fù)雜,各種promoter,各種poly(A),看得很鬧心,也不知道其在這個質(zhì)粒中具體是啥作用的,求高手解析,求分享質(zhì)粒譜圖閱讀的相關(guān)文獻(xiàn)及書本。 pcDNA 3 : CMV promoter: bases 209-863 T7 promoter: bases 864-882 Polylinker: bases 889-994 Sp6 promoter: bases 999-1016 BGH poly A: bases 1018-1249 SV40 promoter: bases 1790-2115 SV40 origin of replication: bases 1984-2069 Neomycin ORF: bases 2151-2945 SV40 poly A: bases 3000-3372 ColE1 origin: bases 3632-4305 Ampicillin ORF: bases 4450-5310 這里面的promoter作用分別什么,BGH poly A,SV40 poly A(有的質(zhì)粒中還有synthetic poly(A) signal)有什么區(qū)別,SV40 origin of replication與ColE1 origin有啥不同? 有的質(zhì)粒圖譜中 謝謝[ Last edited by 肉丸001 on 2011-7-1 at 11:32 ] |
木蟲 (正式寫手)
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都是為了維持篩選標(biāo)記、在不同宿主中復(fù)制、表達(dá)啊。 具體的自己動手查一下就知道了。 Promoter 就是啟動子,在不同用途,不同宿主中啟動轉(zhuǎn)錄。(比如T7 Promoter,為了高表達(dá)某些蛋白,在某些宿主表達(dá)的T7 RNA聚合酶識別后啟動,而CMV promoter 真核中啟動轉(zhuǎn)錄) polyA就是轉(zhuǎn)錄終止信號。SV40 origin of replication與ColE1 origin一個是原核大腸桿菌復(fù)制起始點(diǎn),一個是表達(dá)SV40 T抗原的真核宿主中復(fù)制起始。 |
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