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jinglh8288木蟲 (正式寫手)
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[求助]
HPLC梯度洗脫，總出現(xiàn)很強(qiáng)的一個(gè)峰怎么回事？
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| 實(shí)驗(yàn)室新買了一臺(tái)快速色譜，用的是2.1*50的XDB-C18的色譜柱，0.25mL/min的流速，自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣，乙腈水為流動(dòng)相，梯度條件是50%B運(yùn)行4min,線性梯度，10min時(shí)乙腈增加到100%，并維持10min,結(jié)果不論是運(yùn)行樣品還是只走流動(dòng)相，還是進(jìn)甲醇，在大概14min都會(huì)出現(xiàn)一個(gè)很強(qiáng)的峰，而且基線漂移，同時(shí)監(jiān)測(cè)壓力可以看到在大約13min到14min之間壓力會(huì)從大約135bar降到90bar左右，隨后采集的信號(hào)和壓力基本都為直線……請(qǐng)問這到底是怎么回事呢？進(jìn)樣前，色譜柱已經(jīng)充分平衡好了！很急，謝謝大家的幫助！ |
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jinglh8288
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各位蟲友，今天降低了流速和梯度變化速率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)那個(gè)大峰的響應(yīng)值降低到了原來的六分之一，而且這個(gè)大峰并不是規(guī)則的對(duì)稱尖銳的峰，而且似乎還包含一些小峰（與之前的峰形狀相同，只是強(qiáng)度相差很大），請(qǐng)問這又該如何解釋呢？好困惑��！ 如果這個(gè)大峰是雜質(zhì)，那么為什么用%B的流動(dòng)相卻沒有這樣的大峰呢，而是一條直線，難道有東西只有在梯度洗脫的時(shí)候才能被洗脫掉，而在100%B卻不能洗脫下來？會(huì)有這樣的情況么？懇請(qǐng)各位蟲友幫忙分析一下，先謝謝了！ |
36樓2011-07-08 17:30:05
jinglh8288
木蟲 (正式寫手)
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2樓2011-07-05 11:55:22
3樓2011-07-05 12:02:20
ztagri
銅蟲 (初入文壇)
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4樓2011-07-05 12:07:49
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