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jia21744376

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[求助] 高效液相我要測(cè)的成分岀峰很小，可是在2-5min會(huì)出一個(gè)平頭的大峰，為什么？

我做的是高效液相測(cè)枳術(shù)湯中辛弗林和白術(shù)內(nèi)酯的含量，高效液相進(jìn)樣后，在2-5min會(huì)出一個(gè)很大的平頭峰，可是我要測(cè)的成分岀峰很小，幾乎就是可積分可是看不到峰。平頭峰可能是因?yàn)槲疫M(jìn)樣量大吧。怎么辦？可是我要的成分含量太少了啊。是不是我的提取方法不行呢，我是用熱回流水提的，

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1樓 2011-07-05 22:12:02

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yguang

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★
karl2100(金幣+1): 謝謝！ 2011-07-06 00:29:12

那個(gè)平頭大峰是進(jìn)樣峰吧，，成分太少只能想法濃縮或者或提取方法了！

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2樓2011-07-05 22:18:44

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【答案】應(yīng)助回帖

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jia21744376(金幣+5): 有理 2011-07-09 07:28:23
qinhy(金幣+1): 多謝應(yīng)助回帖~~~ 2011-07-10 19:44:44

引用回帖:

Originally posted by jia21744376 at 2011-07-05 22:12:02:
我做的是高效液相測(cè)枳術(shù)湯中辛弗林和白術(shù)內(nèi)酯的含量，高效液相進(jìn)樣后，在2-5min會(huì)出一個(gè)很大的平頭峰，可是我要測(cè)的成分岀峰很小，幾乎就是可積分可是看不到峰。平頭峰可能是因?yàn)槲疫M(jìn)樣量大吧。怎么辦？可是我要的 ...

液相前面有平頭峰說(shuō)明你的樣品中有比較多的極性大的雜質(zhì)，辛弗林和白術(shù)內(nèi)酯是極性較小的成分，你卻用水回流提取肯定不合適，你換換提取溶劑試試？比如乙醇，乙酸乙酯之類的……

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3樓2011-07-06 08:24:17

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引用回帖:

Originally posted by yguang at 2011-07-05 22:18:44:
那個(gè)平頭大峰是進(jìn)樣峰吧，，成分太少只能想法濃縮或者或提取方法了！

辛弗林是小分子生物堿，文獻(xiàn)中寫水提和醇提的效果基本差不多，如果我先用酸水提，再用醇提，你覺(jué)得可行嘛？剛開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)，很多問(wèn)題都不懂，麻煩了

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4樓2011-07-09 07:34:36

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Originally posted by jia21744376 at 2011-07-09 07:34:36:
辛弗林是小分子生物堿，文獻(xiàn)中寫水提和醇提的效果基本差不多，如果我先用酸水提，再用醇提，你覺(jué)得可行嘛？剛開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)，很多問(wèn)題都不懂，麻煩了

不好意思，這方面我也沒(méi)什么經(jīng)驗(yàn)！

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5樓2011-07-09 09:08:30

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james_yy

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karl2100(金幣+1): 多謝指教！ 2011-07-09 13:22:50
karl2100(金幣+1): 多謝指教！ 2011-07-10 01:25:34
karl2100(金幣-1): 操作出了點(diǎn)問(wèn)題。抱歉！ 2011-07-10 01:26:27
jia21744376(金幣+2): 很細(xì)致 2011-07-11 21:26:19

生物堿用酸水提，理論上沒(méi)錯(cuò)，但看你要派什么用場(chǎng)，酸水畢竟還是以水為主，那么大量水溶性成分就會(huì)溶解在里面，所以你就看到平頭峰了，一般生物堿都能很好地溶解在乙醇中，所以建議用乙醇提，酸水對(duì)一些脂溶性很強(qiáng)的生物堿溶解性也不好，不信你可以用二者都試一下，看看是酸水好還是乙醇好

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karl2100(金幣+1): 多謝指教！ 2011-07-10 01:26:51
jia21744376(金幣+2): 很有幫助 2011-07-11 21:27:11

有沒(méi)有進(jìn)空白溶劑?除了可能是樣品里的東西,也可能是你溶劑里的雜質(zhì).
對(duì)于含量測(cè)定,你沒(méi)有必要關(guān)心你的非目標(biāo)成分(只要它不影響你對(duì)目標(biāo)成分的分離:基線平穩(wěn),Rs＞=1.5).如果目標(biāo)成功的響應(yīng)值太低,你最好測(cè)一下定量限(LOD>=10),如果低于這個(gè)值,你最好想辦法把目標(biāo)成分的峰高提高(濃縮,加大進(jìn)樣量等)

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7樓2011-07-09 22:14:42

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qinhy(金幣+1): 多謝應(yīng)助回帖~~~ 2011-07-10 19:44:52

中藥復(fù)方測(cè)HPLC色譜圖，基本就是這樣的，前面出現(xiàn)的峰，是處方中其他成分的集中表現(xiàn)，只要不影響所要測(cè)定的目標(biāo)峰，就不成問(wèn)題了！

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8樓2011-07-09 23:30:28

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Originally posted by yguang at 2011-07-09 09:08:30:
不好意思，這方面我也沒(méi)什么經(jīng)驗(yàn)！

當(dāng)初預(yù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候過(guò)用水和乙醇都提取過(guò)，的確乙醇提取含量是相應(yīng)的高一些，當(dāng)時(shí)我的考慮是想知道的是枳術(shù)湯服用時(shí)的目標(biāo)成分含量多少，水提更能說(shuō)明問(wèn)題，以為后面水提優(yōu)化一下峰可能會(huì)好一些，沒(méi)想到現(xiàn)在這峰實(shí)在小的可憐

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9樓2011-07-11 21:38:28

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Originally posted by james_yy at 2011-07-09 13:11:24:
生物堿用酸水提，理論上沒(méi)錯(cuò)，但看你要派什么用場(chǎng)，酸水畢竟還是以水為主，那么大量水溶性成分就會(huì)溶解在里面，所以你就看到平頭峰了，一般生物堿都能很好地溶解在乙醇中，所以建議用乙醇提，酸水對(duì)一些脂溶性很強(qiáng) ...

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