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熒光蛋白酶的制備方法
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我想標(biāo)記酶， 文獻(xiàn)上的方法是這樣的 1。將40mg的漆酶加入到1mlpbs中，再加入1.5mlCBS（碳酸鹽緩沖液） 2.在另一只試管中加入一定量的FITC（熒光標(biāo)記物）分散到0.3ml的CBS中 3.迅速將2步中的FITC加入到1步中的漆酶溶液中， 4.室溫?cái)嚢?h，再離心15min 5.用葡聚糖凝膠G-15洗去上層的懸濁液 6.得到FITC標(biāo)記的漆酶，收集到3個(gè)試管中，于-20度保存 但是遇到3個(gè)問(wèn)題就是： 2步中FITC一般對(duì)應(yīng)于酶（不是抗體）的用量是多少 5步中一般情況FITC的來(lái)標(biāo)記酶的時(shí)候要用到葡聚糖凝膠洗去酶上方的懸浮液，這是個(gè)大問(wèn)題，具體怎樣操作使用葡聚糖凝膠洗呢，網(wǎng)上的太多，不知道選取哪種，有做過(guò)的，給常用簡(jiǎn)單易行唄？十分感謝，在這里作揖了。 6步中的收集，到底什么時(shí)間收集的出來(lái)的是需要的蛋白質(zhì)呢。 ps：這個(gè)凝聚糖凝膠到底要用什么泡，泡多久，有的是6h，有的是24h，到底聽(tīng)那個(gè)？ 期待您的回復(fù) [ Last edited by xubuoshi on 2011-7-6 at 16:06 ] |
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4樓2011-07-09 14:35:31
2樓2011-07-07 11:09:40
tyhjqxbz
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3樓2011-07-09 09:28:57
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