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yc1crystal新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求測定谷氨酰胺酶酶活的標(biāo)準(zhǔn)方法,包括分解和轉(zhuǎn)化的酶活,還有些別的困惑,望關(guān)注
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在看文獻(xiàn)時(shí),文獻(xiàn)中說谷氨酰胺酶(GA)的一個(gè)酶活單位定義為:在30℃下,2.5mM的γ-谷酰基對硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸,100mM咪唑鹽酸緩沖液(pH9.0)以及粗酶液中,每分鐘生成1μmol對硝基苯胺所需要的酶量。但是文中又分別說明了谷氨酰胺酶的γ-谷;D(zhuǎn)移活力和γ-谷;饣盍Φ臏y定方法,其中測定水解酶活時(shí)用到了對硝基苯胺的那個(gè)方法,但是轉(zhuǎn)移酶活的方法根本沒有用到γ-谷酰基對硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸。那酶活的單位又怎么定義呢??![]() 好吧,我承認(rèn)我笨,還有個(gè)問題,就是:在測定酶活時(shí),大多會(huì)有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法,對吧?比如:先準(zhǔn)備pH7.0的緩沖液和細(xì)胞一起破碎得到上清液即粗酶液,然后用這個(gè)粗酶液加入到不同pH的緩沖液中測定不同pH下的酶活,我測出來啦。但是我的反應(yīng)也要在不同pH值下并且以測定后的酶活為指導(dǎo)把谷氨酰胺酶加入到底物中反應(yīng),我不知道這個(gè)酶活是要在不同pH下測定的酶活為指導(dǎo),還是那個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法(比如pH9.0)下測出來的為基準(zhǔn)。。。 哎呀呀,我也不知道我說的請不清楚,反正現(xiàn)在這兩個(gè)主要問題好困擾呀,求高手指點(diǎn),你的每句話都有可能幫助我呢,多謝大家指教。 ![]() ![]() |
金蟲 (小有名氣)
| 但是文中又分別說明了谷氨酰胺酶的γ-谷;D(zhuǎn)移活力和γ-谷;饣盍Φ臏y定方法,其中測定水解酶活時(shí)用到了對硝基苯胺的那個(gè)方法,但是轉(zhuǎn)移酶活的方法根本沒有用到γ-谷;鶎ο趸桨泛透拾滨8拾彼。那酶活的單位又怎么定義呢??------------------------------這有嘛關(guān)系?????? |

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