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猶寒鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
TA克隆 已有4人參與
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請(qǐng)問(wèn)： 我用takara的試劑盒做克隆，目的片段是PCR割膠回收的片段，長(zhǎng)度從300bp-700bp都有，但是連接出來(lái)的藍(lán)白篩選很好，有很多白斑，但是，送去測(cè)序后，測(cè)出來(lái)好多的空質(zhì)粒，不知道是什么原因，如果是沒(méi)連上，那應(yīng)該是藍(lán)斑才對(duì)啊，為什么那么多白斑都是質(zhì)粒呢？ |
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anlewo7777
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+5, EPI+1): 說(shuō)得很好！ 2011-07-21 11:27:29
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西瓜(金幣+5, EPI+1): 說(shuō)得很好！ 2011-07-21 11:27:29
| 你可以控制一下檢查的時(shí)間，最好是16小時(shí)以內(nèi)，時(shí)間長(zhǎng)了，氨芐降解到不能抑制未轉(zhuǎn)化菌生長(zhǎng)，可能會(huì)挑到?jīng)]有質(zhì)粒的菌；至于假陽(yáng)性，也可能是你的X-GAL涂的不好，不行你就直接加到培養(yǎng)基里吧；另外，你挑的陽(yáng)性克隆可以先提一下質(zhì)粒，看一下有沒(méi)有質(zhì)粒變長(zhǎng)再送去測(cè)序 |
2樓2011-07-21 10:32:56
★ ★ ★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+2): 鼓勵(lì)交流！一般都是檢驗(yàn)過(guò)有外源片段連進(jìn)去再測(cè)序呢。 2011-07-21 11:28:05
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+2): 鼓勵(lì)交流！一般都是檢驗(yàn)過(guò)有外源片段連進(jìn)去再測(cè)序呢。 2011-07-21 11:28:05
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3樓2011-07-21 10:48:46
小米飯
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4樓2011-07-21 11:06:07
sxxuan
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5樓2011-07-21 12:04:26
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