mmzhang

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 85.2
帖子: 117
在線: 209.6小時(shí)
蟲號(hào): 666480

[交流] 關(guān)于農(nóng)桿菌侵染洋蔥表皮

請(qǐng)問(wèn)哪位大俠有做過(guò)農(nóng)桿菌侵染洋蔥表皮來(lái)做基因的亞細(xì)胞的定位的？
我嘗試了一次，但是失敗了，現(xiàn)請(qǐng)教有做過(guò)的大俠幾個(gè)問(wèn)題：
1、乙酰丁香酮的濃度多少合適？
2、侵染后共培養(yǎng)時(shí)是否也需要加乙酰丁香酮？
3、共培養(yǎng)時(shí)要加光照嗎？
希望做過(guò)的大俠給點(diǎn)建議，謝謝了�。。。�

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇” 已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有73人回復(fù)
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

關(guān)于紅外計(jì)算聚乙烯結(jié)晶度已經(jīng)有3人回復(fù)
求助關(guān)于elsevier的nomenclature（符號(hào)命名表）作法已經(jīng)有7人回復(fù)
----關(guān)于CSC群里提到的評(píng)審以電子材料為主，紙質(zhì)材料備案的問(wèn)題------- 已經(jīng)有24人回復(fù)
一直有個(gè)關(guān)于聯(lián)培公派的問(wèn)題，希望知道的人給于一點(diǎn)幫助已經(jīng)有6人回復(fù)
關(guān)于陽(yáng)光保險(xiǎn)打電話過(guò)來(lái)讓買保險(xiǎn)的那些事已經(jīng)有8人回復(fù)
新人求助大家！！關(guān)于溶解度的問(wèn)題。已經(jīng)有37人回復(fù)
關(guān)于植物蒸騰作用的調(diào)節(jié) 已經(jīng)有6人回復(fù)
新藥板塊關(guān)于刷應(yīng)助指數(shù)的說(shuō)明已經(jīng)有5人回復(fù)
關(guān)于壁面邊界層網(wǎng)格劃分問(wèn)題已經(jīng)有12人回復(fù)
關(guān)于用農(nóng)桿菌侵染法獲得轉(zhuǎn)基因植物的幾點(diǎn)問(wèn)題已經(jīng)有17人回復(fù)
求助！農(nóng)桿菌侵染霉菌孢子的問(wèn)題。謝謝大家啦已經(jīng)有5人回復(fù)
關(guān)于洋蔥表皮亞細(xì)胞定位的問(wèn)題～～已經(jīng)有8人回復(fù)
【求助/交流】我農(nóng)桿菌侵染后的水稻愈傷，為啥不分化了啊~~~ 已經(jīng)有11人回復(fù)
【求助/交流】農(nóng)桿菌侵染法確定基因在洋蔥表皮細(xì)胞中的表達(dá) 已經(jīng)有10人回復(fù)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2011-07-22 19:44:33

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

shaquila

金蟲 (正式寫手)

MolEPI: 5
應(yīng)助: 37 (小學(xué)生)
金幣: 1484.8
帖子: 553
在線: 182.3小時(shí)
蟲號(hào): 654839

★ ★ ★
mmzhang(金幣+5):謝謝參與
西瓜(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-07-23 17:34:30
mmzhang(金幣+1): 4 2011-07-24 10:36:44

這個(gè)我也試過(guò)，不成功～～～
感覺預(yù)培養(yǎng)條件比較重要，但是沒有文獻(xiàn)支持，都是一堆碩士論文～～～
如果你成功了，順便告訴我方法吧

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

2樓2011-07-23 11:45:53

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

十比

木蟲 (著名寫手)

MolEPI: 1
應(yīng)助: 39 (小學(xué)生)
金幣: 3209.9
帖子: 1204
在線: 569小時(shí)
蟲號(hào): 221737

★
mmzhang(金幣+5):謝謝參與
mmzhang(金幣+1): 4 2011-07-24 10:36:55

做應(yīng)該能做出來(lái)，只是表達(dá)可能很弱

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

3樓2011-07-23 17:29:21

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

十比

木蟲 (著名寫手)

MolEPI: 1
應(yīng)助: 39 (小學(xué)生)
金幣: 3209.9
帖子: 1204
在線: 569小時(shí)
蟲號(hào): 221737

★ ★
西瓜(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-07-23 18:28:38
mmzhang(金幣+1): 4 2011-07-24 10:37:00

劉海燕, 馮冬茹, 劉兵, 何炎明, 王宏斌 and 王金發(fā) (2009) 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的MpASR蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞的定位研究. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 你按照這篇文章試試，希望對(duì)你有用。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

4樓2011-07-23 17:42:53

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

changes

木蟲 (正式寫手)

MolEPI: 3
應(yīng)助: 5 (幼兒園)
金幣: 3142.7
帖子: 393
在線: 254.6小時(shí)
蟲號(hào): 142029

★
mmzhang(金幣+5):謝謝參與
mmzhang(金幣+1): 2011-07-24 10:34:35

引用回帖:

Originally posted by mmzhang at 2011-07-22 19:44:33:
請(qǐng)問(wèn)哪位大俠有做過(guò)農(nóng)桿菌侵染洋蔥表皮來(lái)做基因的亞細(xì)胞的定位的？
我嘗試了一次，但是失敗了，現(xiàn)請(qǐng)教有做過(guò)的大俠幾個(gè)問(wèn)題：
1、乙酰丁香酮的濃度多少合適？
2、侵染后共培養(yǎng)時(shí)是否也需要加乙酰丁香酮？
3、 ...

問(wèn)一下，是使用GFP標(biāo)記目的蛋白嗎？
建議使用煙草下表皮或擬南芥下表皮，洋蔥表皮的細(xì)胞非常簡(jiǎn)單，除了細(xì)胞核、液泡、膜和壁外，沒有其他明顯的亞細(xì)胞器，因此萬(wàn)一你的蛋白定位在葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等細(xì)胞器時(shí)，無(wú)法明確位置啊。

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

5樓2011-07-23 19:43:23

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

mmzhang

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 85.2
帖子: 117
在線: 209.6小時(shí)
蟲號(hào): 666480

引用回帖:

Originally posted by changes at 2011-07-23 19:43:23:
問(wèn)一下，是使用GFP標(biāo)記目的蛋白嗎？
建議使用煙草下表皮或擬南芥下表皮，洋蔥表皮的細(xì)胞非常簡(jiǎn)單，除了細(xì)胞核、液泡、膜和壁外，沒有其他明顯的亞細(xì)胞器，因此萬(wàn)一你的蛋白定位在葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等細(xì)胞 ...

是用GFP標(biāo)記的，我的基因不是在細(xì)胞器上的，應(yīng)該在液泡膜或細(xì)胞質(zhì)膜上，如果用煙草或擬南芥的表皮的話就沒辦法區(qū)分。

贊一下

回復(fù)此樓

6樓2011-07-24 10:40:25

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

mmzhang

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 85.2
帖子: 117
在線: 209.6小時(shí)
蟲號(hào): 666480

引用回帖:

Originally posted by 十比 at 2011-07-23 17:42:53:
劉海燕, 馮冬茹, 劉兵, 何炎明, 王宏斌 and 王金發(fā) (2009) 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的MpASR蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞的定位研究. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 你按照這篇文章試試，希望對(duì)你有用。

我就是參考這篇文獻(xiàn)在做的，但是發(fā)現(xiàn)里面的乙酰丁香酮的濃度是100 mM，但有其它文獻(xiàn)寫的是100 uM，所以不能確定是哪個(gè)濃度。
你有試過(guò)嗎，能不能給點(diǎn)建議？

贊一下

回復(fù)此樓

7樓2011-07-24 10:42:33

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lzhwin

木蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 9 (幼兒園)
金幣: 1977.1
帖子: 489
在線: 58.1小時(shí)
蟲號(hào): 481076

★
mmzhang(金幣+5):謝謝參與

看過(guò)周圍好幾個(gè)人做過(guò)，沒一個(gè)人做出來(lái)的。就算能看到一點(diǎn)熒光本底也非常強(qiáng)，根本達(dá)不到發(fā)文章的要求。
所以，還是打基因槍吧，真的是低本底高特異性。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

8樓2011-07-26 23:30:37

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

簡(jiǎn)單回復(fù)

sgx7049樓

2011-07-27 09:01 回復(fù)

mmzhang(金幣+5):謝謝參與

fruitbbs10樓

2012-05-22 14:24 回復(fù)

mmzhang(金幣+1): 謝謝參與

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]	作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級(jí)已過(guò) +3	幸運(yùn)哩哩 2026-03-22	5/250	2026-03-22 11:01 by 楊楊楊紫
[考研] 08工科 320總分求調(diào)劑 +7	梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17	7/350	2026-03-22 10:03 by 2026paper
[考研] 生物學(xué)一志愿985，分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +4	zxts12 2026-03-21	7/350	2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +10	楓橋ZL 2026-03-18	12/600	2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3	收到VS 2026-03-21	3/150	2026-03-21 18:42 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 298求調(diào)劑 +4	上岸6666@ 2026-03-20	4/200	2026-03-21 17:14 by 學(xué)員8dgXkO
[基金申請(qǐng)] 學(xué)校已經(jīng)提交到NSFC，還能修改嗎？ 40+4	babangida 2026-03-19	9/450	2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3	邱gl 2026-03-21	3/150	2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +12	墨墨漠 2026-03-18	13/650	2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 304求調(diào)劑 +6	曼殊2266 2026-03-18	6/300	2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 296求調(diào)劑 +6	www_q 2026-03-18	10/500	2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 274求調(diào)劑 +10	S.H1 2026-03-18	10/500	2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +15	陌の森林 2026-03-18	15/750	2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 321求調(diào)劑 +9	何潤(rùn)采123 2026-03-18	11/550	2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9	Doleres 2026-03-19	9/450	2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 288求調(diào)劑 +16	于海海海海 2026-03-19	16/800	2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 260求調(diào)劑 +3	朱芷琳 2026-03-20	3/150	2026-03-20 20:35 by 學(xué)員8dgXkO
[考博] 申博26年 +3	八6八68 2026-03-19	3/150	2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10	llllkkkhh 2026-03-18	12/600	2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利，省、國(guó)級(jí)證書40+數(shù)一英一287 +8	小李0854 2026-03-16	8/400	2026-03-18 14:35 by 搏擊518