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戊二醛、多聚甲醛與福爾馬林固定原理及用途的區(qū)別
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| 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，看到有的組織用這三種不同的溶液固定，請(qǐng)各位前輩指點(diǎn)指點(diǎn)，這三者固定的原理及用途的區(qū)別？謝謝！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
宏偉10(金幣+1): 2011-07-31 12:15:49
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甲醛(福爾馬林)應(yīng)用最廣 原理：形成分子間的交聯(lián)，影響蛋白構(gòu)型而使之固定。 優(yōu)點(diǎn)：形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好，且穿透性強(qiáng)，組織收縮少。 缺點(diǎn)： 1甲醛放置過久可氧化為甲酸，使溶液pH降低，影響染色； 2醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙； 3分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露�？稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。 -注意事項(xiàng)： 1縮短固定時(shí)間，降低固定溫度(4C)，為此組織塊不宜過厚。 2改用中性緩沖福爾馬林，以pH值7.2～7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10％甲醛固定液，減少固定液pH的變化。 3固定后充分水洗以減少分子間交聯(lián)。 4切片在作免疫組化染色前，先經(jīng)預(yù)處理使抗原再現(xiàn)(抗原修復(fù))。 戊二醛： 穿透性強(qiáng)，微細(xì)結(jié)構(gòu)保存好，但對(duì)抗原有一定影響，常與其他固定劑聯(lián)合用作免疫電鏡固定液。 多聚甲醛(常用4%)： 可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光染色。 主要檢測(cè)組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別是細(xì)胞表面抗原，例如各類淋巴細(xì)胸分化決定簇(CD)、主要組織相容性抗原等。 |
2樓2011-07-27 10:48:02
山風(fēng)谷風(fēng)
新蟲 (初入文壇)
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- 金幣: 101.7
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3樓2020-06-05 12:36:19
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